热带医学杂志
熱帶醫學雜誌
열대의학잡지
JOURNAL OF TROPICAL MEDICINE
2007年
3期
218-221
,共4页
姜永玮%吴英松%徐伟文%陈跃瑜%彭娟%李明
薑永瑋%吳英鬆%徐偉文%陳躍瑜%彭娟%李明
강영위%오영송%서위문%진약유%팽연%리명
人巨细胞病毒%IgM%PCR%克隆与表达
人巨細胞病毒%IgM%PCR%剋隆與錶達
인거세포병독%IgM%PCR%극륭여표체
目的 克隆表达人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)特异性强的抗原决定簇基因,制备特异性抗原.方法 从感染HCMV的细胞上清液中提取病毒基因组DNA,用PCR扩增HCMVpp150(ppUL32)、gp52(UL44)、pp65(ppUL83)、ppUL80a蛋白IgM抗原决定簇编码区DNA序列,将其克隆至pMD-18T载体并测序,然后克隆至表达载体pGEX-4T-1诱导表达,采用免疫印迹法(Western blotting)检测表达产物的抗原性.结果 经序列测定各基因片段序列正确,并在pGEX-4T-1表达载体中得到了高效表达,表达的融合蛋白经Westernblotting和ELISA分析,具有良好的抗原性,能够与HCMV IgM阳性血清发生特异性反应.结论 通过基因工程技术可以有效地获取纯度较高、特异性强的HCMV抗原,为HCMV感染者的早期诊断提供检测用抗原.
目的 剋隆錶達人巨細胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)特異性彊的抗原決定簇基因,製備特異性抗原.方法 從感染HCMV的細胞上清液中提取病毒基因組DNA,用PCR擴增HCMVpp150(ppUL32)、gp52(UL44)、pp65(ppUL83)、ppUL80a蛋白IgM抗原決定簇編碼區DNA序列,將其剋隆至pMD-18T載體併測序,然後剋隆至錶達載體pGEX-4T-1誘導錶達,採用免疫印跡法(Western blotting)檢測錶達產物的抗原性.結果 經序列測定各基因片段序列正確,併在pGEX-4T-1錶達載體中得到瞭高效錶達,錶達的融閤蛋白經Westernblotting和ELISA分析,具有良好的抗原性,能夠與HCMV IgM暘性血清髮生特異性反應.結論 通過基因工程技術可以有效地穫取純度較高、特異性彊的HCMV抗原,為HCMV感染者的早期診斷提供檢測用抗原.
목적 극륭표체인거세포병독(human cytomegalovirus,HCMV)특이성강적항원결정족기인,제비특이성항원.방법 종감염HCMV적세포상청액중제취병독기인조DNA,용PCR확증HCMVpp150(ppUL32)、gp52(UL44)、pp65(ppUL83)、ppUL80a단백IgM항원결정족편마구DNA서렬,장기극륭지pMD-18T재체병측서,연후극륭지표체재체pGEX-4T-1유도표체,채용면역인적법(Western blotting)검측표체산물적항원성.결과 경서렬측정각기인편단서렬정학,병재pGEX-4T-1표체재체중득도료고효표체,표체적융합단백경Westernblotting화ELISA분석,구유량호적항원성,능구여HCMV IgM양성혈청발생특이성반응.결론 통과기인공정기술가이유효지획취순도교고、특이성강적HCMV항원,위HCMV감염자적조기진단제공검측용항원.
