华中科技大学学报(医学版)
華中科技大學學報(醫學版)
화중과기대학학보(의학판)
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2010年
5期
649-652
,共4页
叶露%李洪涛%王丽丽%邢铭友%宋建新
葉露%李洪濤%王麗麗%邢銘友%宋建新
협로%리홍도%왕려려%형명우%송건신
pvdQ基因%3O-oxo-C12-HSL%密度感应系统%Caco-2细胞
pvdQ基因%3O-oxo-C12-HSL%密度感應繫統%Caco-2細胞
pvdQ기인%3O-oxo-C12-HSL%밀도감응계통%Caco-2세포
目的 探讨铜绿假单胞菌pvdQ基因阻止密度感应系统自体诱导因子3O-oxo-C12-HSL干扰肠道上皮细胞Caco-2的作用.方法 构建带有FLAG标签的pvdQ基因真核表达质粒pIRES2-EGFP-pvdQ并鉴定,将带有pvdQ基因的质粒转染入Caco-2细胞,并用Western blot法检测pvdQ基因在Caco-2细胞中的表达.3O-oxo-C12-HSL干扰转染前后的Caco-2细胞,利用质谱分析仪检测Caco-2细胞上清中3O-oxo-C12-HSL浓度变化.结果 经酶切鉴定pvdQ基因真核表达载体构建成功,Western blot检测结果显示pvdQ基因能在人肠道上皮细胞Caco-2中表达.质谱分析结果显示,转染pvdQ基因后,Caco-2细胞上清中3O-oxo-C12-HSL浓度明显减少(P<0.05).结论 pvdQ基因成功在人肠道上皮细胞Caco-2中表达,并降解细胞周围3O-oxo-C12-HSL分子,为进一步研究pvdQ基因对Caco-2细胞的保护作用奠定基础.
目的 探討銅綠假單胞菌pvdQ基因阻止密度感應繫統自體誘導因子3O-oxo-C12-HSL榦擾腸道上皮細胞Caco-2的作用.方法 構建帶有FLAG標籤的pvdQ基因真覈錶達質粒pIRES2-EGFP-pvdQ併鑒定,將帶有pvdQ基因的質粒轉染入Caco-2細胞,併用Western blot法檢測pvdQ基因在Caco-2細胞中的錶達.3O-oxo-C12-HSL榦擾轉染前後的Caco-2細胞,利用質譜分析儀檢測Caco-2細胞上清中3O-oxo-C12-HSL濃度變化.結果 經酶切鑒定pvdQ基因真覈錶達載體構建成功,Western blot檢測結果顯示pvdQ基因能在人腸道上皮細胞Caco-2中錶達.質譜分析結果顯示,轉染pvdQ基因後,Caco-2細胞上清中3O-oxo-C12-HSL濃度明顯減少(P<0.05).結論 pvdQ基因成功在人腸道上皮細胞Caco-2中錶達,併降解細胞週圍3O-oxo-C12-HSL分子,為進一步研究pvdQ基因對Caco-2細胞的保護作用奠定基礎.
목적 탐토동록가단포균pvdQ기인조지밀도감응계통자체유도인자3O-oxo-C12-HSL간우장도상피세포Caco-2적작용.방법 구건대유FLAG표첨적pvdQ기인진핵표체질립pIRES2-EGFP-pvdQ병감정,장대유pvdQ기인적질립전염입Caco-2세포,병용Western blot법검측pvdQ기인재Caco-2세포중적표체.3O-oxo-C12-HSL간우전염전후적Caco-2세포,이용질보분석의검측Caco-2세포상청중3O-oxo-C12-HSL농도변화.결과 경매절감정pvdQ기인진핵표체재체구건성공,Western blot검측결과현시pvdQ기인능재인장도상피세포Caco-2중표체.질보분석결과현시,전염pvdQ기인후,Caco-2세포상청중3O-oxo-C12-HSL농도명현감소(P<0.05).결론 pvdQ기인성공재인장도상피세포Caco-2중표체,병강해세포주위3O-oxo-C12-HSL분자,위진일보연구pvdQ기인대Caco-2세포적보호작용전정기출.