厦门大学学报（自然科学版）
廈門大學學報（自然科學版）
하문대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2011年
1期
88-92
,共5页
江腾%邹婷云%束必烈%敬科举%凌雪萍%卢英华
江騰%鄒婷雲%束必烈%敬科舉%凌雪萍%盧英華
강등%추정운%속필렬%경과거%릉설평%로영화
barnase%kil-Km分泌盒%大肠杆菌JM109(DE3)%流加培养
barnase%kil-Km分泌盒%大腸桿菌JM109(DE3)%流加培養
barnase%kil-Km분비합%대장간균JM109(DE3)%류가배양
核糖核酸酶Ba(barnase)是一种产自解淀粉芽孢杆菌的胞外核糖核酸酶,具有强毒性,能降解RNA,在农业、医疗、制药等领域有广泛的应用前景.利用重组表达barnase的大肠杆菌为研究对象,以期使用kil基因改善分泌状况,并实现大肠杆菌的高密度培养以及蛋白的高产表达.通过把kil-Km分泌盒克隆入质粒载体pET-32a(+)-barnase-barstar使barnase更加容易分泌与纯化,并使用Riesenberg培养基对重组大肠杆菌发酵生产barnase的不同葡萄糖浓度底物反馈控制补料流加策略进行了研究.初步确定1.0g/L葡萄糖底物反馈流加时,获得的barnase酶活最高,为7.14 kU/mL,是文献报道的1.88倍,此时细胞干质量浓度为22.93g/L,其中细胞间质的酶活达到3.53 kU/mL.为今后的发酵barnase研究提供了参考.
覈糖覈痠酶Ba(barnase)是一種產自解澱粉芽孢桿菌的胞外覈糖覈痠酶,具有彊毒性,能降解RNA,在農業、醫療、製藥等領域有廣汎的應用前景.利用重組錶達barnase的大腸桿菌為研究對象,以期使用kil基因改善分泌狀況,併實現大腸桿菌的高密度培養以及蛋白的高產錶達.通過把kil-Km分泌盒剋隆入質粒載體pET-32a(+)-barnase-barstar使barnase更加容易分泌與純化,併使用Riesenberg培養基對重組大腸桿菌髮酵生產barnase的不同葡萄糖濃度底物反饋控製補料流加策略進行瞭研究.初步確定1.0g/L葡萄糖底物反饋流加時,穫得的barnase酶活最高,為7.14 kU/mL,是文獻報道的1.88倍,此時細胞榦質量濃度為22.93g/L,其中細胞間質的酶活達到3.53 kU/mL.為今後的髮酵barnase研究提供瞭參攷.
핵당핵산매Ba(barnase)시일충산자해정분아포간균적포외핵당핵산매,구유강독성,능강해RNA,재농업、의료、제약등영역유엄범적응용전경.이용중조표체barnase적대장간균위연구대상,이기사용kil기인개선분비상황,병실현대장간균적고밀도배양이급단백적고산표체.통과파kil-Km분비합극륭입질립재체pET-32a(+)-barnase-barstar사barnase경가용역분비여순화,병사용Riesenberg배양기대중조대장간균발효생산barnase적불동포도당농도저물반궤공제보료류가책략진행료연구.초보학정1.0g/L포도당저물반궤류가시,획득적barnase매활최고,위7.14 kU/mL,시문헌보도적1.88배,차시세포간질량농도위22.93g/L,기중세포간질적매활체도3.53 kU/mL.위금후적발효barnase연구제공료삼고.
