福建农林大学学报（自然科学版）
福建農林大學學報（自然科學版）
복건농림대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF FUJIAN AGRICULTURE AND FORESTRY UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2012年
5期
513-517
,共5页
黄鹭强%张丽萍%雷秀清%林志钦%郑宝东
黃鷺彊%張麗萍%雷秀清%林誌欽%鄭寶東
황로강%장려평%뢰수청%림지흠%정보동
粟酒裂殖酵母%苹果酸通透酶%产朊假丝酵母%整合重组表达
粟酒裂殖酵母%蘋果痠通透酶%產朊假絲酵母%整閤重組錶達
속주렬식효모%평과산통투매%산원가사효모%정합중조표체
以粟酒裂殖酵母基因组DNA为模版,逆转录获得cDNA;以cDNA为模板,采用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增,得到苹果酸通透酶(mae1)基因,将其与pMD-18T连接并测序.结果表明cDNA全长为1316 bp,编码438氨基酸,分子质量49ku,与已报道的mae1基因序列的同源性达到99％.mae1与整合型表达质粒pSH47连接后,用重组的表达质粒转化产朊假丝酵母,经PCR验证筛选阳性克隆子.通过对转化子的摇瓶筛选,发现重组子的降酸幅度均大于原始菌株,培养40h降解了48.6％的L-苹果酸,降解率比原始菌株提高了9.8％.
以粟酒裂殖酵母基因組DNA為模版,逆轉錄穫得cDNA;以cDNA為模闆,採用聚閤酶鏈式反應(PCR)技術擴增,得到蘋果痠通透酶(mae1)基因,將其與pMD-18T連接併測序.結果錶明cDNA全長為1316 bp,編碼438氨基痠,分子質量49ku,與已報道的mae1基因序列的同源性達到99％.mae1與整閤型錶達質粒pSH47連接後,用重組的錶達質粒轉化產朊假絲酵母,經PCR驗證篩選暘性剋隆子.通過對轉化子的搖瓶篩選,髮現重組子的降痠幅度均大于原始菌株,培養40h降解瞭48.6％的L-蘋果痠,降解率比原始菌株提高瞭9.8％.
이속주렬식효모기인조DNA위모판,역전록획득cDNA;이cDNA위모판,채용취합매련식반응(PCR)기술확증,득도평과산통투매(mae1)기인,장기여pMD-18T련접병측서.결과표명cDNA전장위1316 bp,편마438안기산,분자질량49ku,여이보도적mae1기인서렬적동원성체도99％.mae1여정합형표체질립pSH47련접후,용중조적표체질립전화산원가사효모,경PCR험증사선양성극륭자.통과대전화자적요병사선,발현중조자적강산폭도균대우원시균주,배양40h강해료48.6％적L-평과산,강해솔비원시균주제고료9.8％.
