微生物学免疫学进展
微生物學免疫學進展
미생물학면역학진전
PROGRESS IN MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2012年
4期
29-33
,共5页
肖詹蓉%潘殊男%张霖阳%王宇星%史雨舟%李工%张萍
肖詹蓉%潘殊男%張霖暘%王宇星%史雨舟%李工%張萍
초첨용%반수남%장림양%왕우성%사우주%리공%장평
ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗%多糖含量%酶联免疫吸附试验
ACYW135群腦膜炎毬菌多糖疫苗%多糖含量%酶聯免疫吸附試驗
ACYW135군뇌막염구균다당역묘%다당함량%매련면역흡부시험
目的 建立双抗体夹心ELISA法,对A群流脑多糖抗原进行特异性定量测定.方法 制备抗A群多糖的特异性多克隆抗体,所得抗血清经辛酸-硫酸铵沉淀法纯化后,用过碘酸钠法制备辣根过氧化物酶标记多克隆抗体.分别以抗A群多糖多克隆抗体作为包被抗体及酶标二抗,建立双抗体夹心ELISA法,优化反应条件,对A群多糖抗原进行特异性定量测定.结果 一系列验证试验表明,该法特异性较好,未检出与C、Y、W135群多糖的交叉反应；1.25 ～ 20 ng/mL多糖浓度范围的剂量反应曲线线性最佳,相关系数大于0.98,经实验内10次及不同试验间以16、8、4 ng/mL测定3次A群多糖中的含量,变异系数在6.3％ ～11.5％间,回收率在91.8％～105.9％之间,符合常规质控要求,检测限量为4 ng/mL.采用该法测定3批ACYW135群四价脑膜炎球菌多糖疫苗中A群多糖含量、分子大小及回收率的结果均符合规程草案质量标准.结论 建立的双抗体夹心ELISA法可尝试用于ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗中A群多糖的关键质量指标的检测.
目的 建立雙抗體夾心ELISA法,對A群流腦多糖抗原進行特異性定量測定.方法 製備抗A群多糖的特異性多剋隆抗體,所得抗血清經辛痠-硫痠銨沉澱法純化後,用過碘痠鈉法製備辣根過氧化物酶標記多剋隆抗體.分彆以抗A群多糖多剋隆抗體作為包被抗體及酶標二抗,建立雙抗體夾心ELISA法,優化反應條件,對A群多糖抗原進行特異性定量測定.結果 一繫列驗證試驗錶明,該法特異性較好,未檢齣與C、Y、W135群多糖的交扠反應；1.25 ～ 20 ng/mL多糖濃度範圍的劑量反應麯線線性最佳,相關繫數大于0.98,經實驗內10次及不同試驗間以16、8、4 ng/mL測定3次A群多糖中的含量,變異繫數在6.3％ ～11.5％間,迴收率在91.8％～105.9％之間,符閤常規質控要求,檢測限量為4 ng/mL.採用該法測定3批ACYW135群四價腦膜炎毬菌多糖疫苗中A群多糖含量、分子大小及迴收率的結果均符閤規程草案質量標準.結論 建立的雙抗體夾心ELISA法可嘗試用于ACYW135群腦膜炎毬菌多糖疫苗中A群多糖的關鍵質量指標的檢測.
목적 건립쌍항체협심ELISA법,대A군류뇌다당항원진행특이성정량측정.방법 제비항A군다당적특이성다극륭항체,소득항혈청경신산-류산안침정법순화후,용과전산납법제비랄근과양화물매표기다극륭항체.분별이항A군다당다극륭항체작위포피항체급매표이항,건립쌍항체협심ELISA법,우화반응조건,대A군다당항원진행특이성정량측정.결과 일계렬험증시험표명,해법특이성교호,미검출여C、Y、W135군다당적교차반응；1.25 ～ 20 ng/mL다당농도범위적제량반응곡선선성최가,상관계수대우0.98,경실험내10차급불동시험간이16、8、4 ng/mL측정3차A군다당중적함량,변이계수재6.3％ ～11.5％간,회수솔재91.8％～105.9％지간,부합상규질공요구,검측한량위4 ng/mL.채용해법측정3비ACYW135군사개뇌막염구균다당역묘중A군다당함량、분자대소급회수솔적결과균부합규정초안질량표준.결론 건립적쌍항체협심ELISA법가상시용우ACYW135군뇌막염구균다당역묘중A군다당적관건질량지표적검측.
