CAJ | 학술논문

RNA干扰(RNA interference,RNAi)作为一种特异性沉默基因表达的方法,正在成为研究基因功能、胚胎发育及病毒性疾病治疗的重要工具.为了了解RNA干扰在禽类中的作用情况,实验将体外转录合成的绿荧光蛋白短双链干扰RNA(siGFP)和3-磷酸甘油醛脱氢酶短双链干扰RNA(siGAPDH)分别同绿荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)表达载体(pEGFP-CI Vector)用脂质体转染试剂LipofectamineTM 2000共转染鸡胚盘细胞,并于转染后36 h在荧光显微镜下观察转染和干扰效果.对细胞绿荧光蛋白表达率的方差分析结果显示,不同处理组间差异达极显著水准,其中GFP组和GFP+siGAPDH组均同GFP+siGFP组差异极显著,GFP组同GFP+siGAPDH组差异不显著.实验结果说明,siGFP能特异、有效地敲低细胞绿荧光蛋白的表达.同线虫、真菌、拟南芥、水螅、锥虫、涡虫、果蝇、斑马鱼、小鼠等其它生物体一样,鸡胚盘细胞中也存在短双链下扰RNA(siRNA)特异性沉默基因表达的RNA干扰机制[动物学报50(2):302-307,2004].
RNA간우(RNA interference,RNAi)작위일충특이성침묵기인표체적방법,정재성위연구기인공능、배태발육급병독성질병치료적중요공구.위료료해RNA간우재금류중적작용정황,실험장체외전록합성적록형광단백단쌍련간우RNA(siGFP)화3-린산감유철탈경매단쌍련간우RNA(siGAPDH)분별동록형광단백(Green fluorescent protein,GFP)표체재체(pEGFP-CI Vector)용지질체전염시제LipofectamineTM 2000공전염계배반세포,병우전염후36 h재형광현미경하관찰전염화간우효과.대세포록형광단백표체솔적방차분석결과현시,불동처리조간차이체겁현저수준,기중GFP조화GFP+siGAPDH조균동GFP+siGFP조차이겁현저,GFP조동GFP+siGAPDH조차이불현저.실험결과설명,siGFP능특이、유효지고저세포록형광단백적표체.동선충、진균、의남개、수실、추충、와충、과승、반마어、소서등기타생물체일양,계배반세포중야존재단쌍련하우RNA(siRNA)특이성침묵기인표체적RNA간우궤제[동물학보50(2):302-307,2004].