分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2005年
9期
1207-1210
,共4页
蛋白质组学%溶液酶解%胶内酶解%质谱
蛋白質組學%溶液酶解%膠內酶解%質譜
단백질조학%용액매해%효내매해%질보
报道了改进的凝胶电泳分离后蛋白质溶液酶解方法.将凝胶分离后的蛋白转移到PVDF膜上,直接用碳酸氢铵中和从膜上的蛋白洗脱溶液至弱碱性,并在此溶液中直接进行蛋白酶解.方法避免了胶内杂质对质谱鉴定蛋白质的干扰.用标准蛋白进行了验证,并在此基础上鉴定了中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞系中的16个蛋白点.与已报道的方法比较,本方法蛋白回收率提高到90%左右;与传统的胶内酶解方法比较,本方法具操作简单,实验流程较短;涉及的试剂较胶内酶解少,因此带来的杂质影响小;在蛋白转印以后还可与许多其它实验方法相结合,比如免疫印迹等优点.
報道瞭改進的凝膠電泳分離後蛋白質溶液酶解方法.將凝膠分離後的蛋白轉移到PVDF膜上,直接用碳痠氫銨中和從膜上的蛋白洗脫溶液至弱堿性,併在此溶液中直接進行蛋白酶解.方法避免瞭膠內雜質對質譜鑒定蛋白質的榦擾.用標準蛋白進行瞭驗證,併在此基礎上鑒定瞭中國倉鼠卵巢細胞(CHO)細胞繫中的16箇蛋白點.與已報道的方法比較,本方法蛋白迴收率提高到90%左右;與傳統的膠內酶解方法比較,本方法具操作簡單,實驗流程較短;涉及的試劑較膠內酶解少,因此帶來的雜質影響小;在蛋白轉印以後還可與許多其它實驗方法相結閤,比如免疫印跡等優點.
보도료개진적응효전영분리후단백질용액매해방법.장응효분리후적단백전이도PVDF막상,직접용탄산경안중화종막상적단백세탈용액지약감성,병재차용액중직접진행단백매해.방법피면료효내잡질대질보감정단백질적간우.용표준단백진행료험증,병재차기출상감정료중국창서란소세포(CHO)세포계중적16개단백점.여이보도적방법비교,본방법단백회수솔제고도90%좌우;여전통적효내매해방법비교,본방법구조작간단,실험류정교단;섭급적시제교효내매해소,인차대래적잡질영향소;재단백전인이후환가여허다기타실험방법상결합,비여면역인적등우점.
