南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2006年
10期
1388-1393
,共6页
刘朝晖%马东亮%靳辉%马延兵%胡海涛
劉朝暉%馬東亮%靳輝%馬延兵%鬍海濤
류조휘%마동량%근휘%마연병%호해도
阿尔茨海默病%脑源性神经营养因子%腺伴随病毒%钙超载
阿爾茨海默病%腦源性神經營養因子%腺伴隨病毒%鈣超載
아이자해묵병%뇌원성신경영양인자%선반수병독%개초재
目的 探讨重组腺伴随病毒(rAAV)载体介导表达人脑源性神经营养因子(hBDNF)基因以及表达的hBDNF对β淀粉样蛋白(Aβ)诱导的AD模型神经元保护效应的机制.方法 使用分子克隆技术克隆了hBDNF基因,并且构建了携带hBDNF基因的rAAV病毒载体(AAV-hBDNF),使用病毒载体转染Aβ诱导损伤的海马神经元.使用MTT检测和流式细胞仪分析观察细胞凋亡变化,同时使用免疫细胞化学技术检测了BDNF蛋白以及Bcl-2抗凋亡蛋白的表达,使用激光共聚焦显微镜观察细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的变化.结果 结果显示重组病毒对培养的海马神经元进行了有效的转染,BDNF蛋白表达水平明显增高,表达的BDNF对Aβ诱导的神经元损伤有显著的保护效应,在BDNF治疗组表现出抗凋亡蛋白Bcl-2的表达增高和有效地维持了[Ca2+]i平衡.结论 表达的BDNF通过抑制Aβ依赖的细胞内钙超载和增加抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,有效地保护神经元抵抗Aβ神经毒性引起的凋亡.
目的 探討重組腺伴隨病毒(rAAV)載體介導錶達人腦源性神經營養因子(hBDNF)基因以及錶達的hBDNF對β澱粉樣蛋白(Aβ)誘導的AD模型神經元保護效應的機製.方法 使用分子剋隆技術剋隆瞭hBDNF基因,併且構建瞭攜帶hBDNF基因的rAAV病毒載體(AAV-hBDNF),使用病毒載體轉染Aβ誘導損傷的海馬神經元.使用MTT檢測和流式細胞儀分析觀察細胞凋亡變化,同時使用免疫細胞化學技術檢測瞭BDNF蛋白以及Bcl-2抗凋亡蛋白的錶達,使用激光共聚焦顯微鏡觀察細胞內遊離鈣離子濃度([Ca2+]i)的變化.結果 結果顯示重組病毒對培養的海馬神經元進行瞭有效的轉染,BDNF蛋白錶達水平明顯增高,錶達的BDNF對Aβ誘導的神經元損傷有顯著的保護效應,在BDNF治療組錶現齣抗凋亡蛋白Bcl-2的錶達增高和有效地維持瞭[Ca2+]i平衡.結論 錶達的BDNF通過抑製Aβ依賴的細胞內鈣超載和增加抗凋亡蛋白Bcl-2的錶達,有效地保護神經元牴抗Aβ神經毒性引起的凋亡.
목적 탐토중조선반수병독(rAAV)재체개도표체인뇌원성신경영양인자(hBDNF)기인이급표체적hBDNF대β정분양단백(Aβ)유도적AD모형신경원보호효응적궤제.방법 사용분자극륭기술극륭료hBDNF기인,병차구건료휴대hBDNF기인적rAAV병독재체(AAV-hBDNF),사용병독재체전염Aβ유도손상적해마신경원.사용MTT검측화류식세포의분석관찰세포조망변화,동시사용면역세포화학기술검측료BDNF단백이급Bcl-2항조망단백적표체,사용격광공취초현미경관찰세포내유리개리자농도([Ca2+]i)적변화.결과 결과현시중조병독대배양적해마신경원진행료유효적전염,BDNF단백표체수평명현증고,표체적BDNF대Aβ유도적신경원손상유현저적보호효응,재BDNF치료조표현출항조망단백Bcl-2적표체증고화유효지유지료[Ca2+]i평형.결론 표체적BDNF통과억제Aβ의뢰적세포내개초재화증가항조망단백Bcl-2적표체,유효지보호신경원저항Aβ신경독성인기적조망.
