食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2008年
2期
205-209
,共5页
夏子芳%石贵阳%张梁%陈卫%王正祥
夏子芳%石貴暘%張樑%陳衛%王正祥
하자방%석귀양%장량%진위%왕정상
植物乳杆菌%噬淀粉乳杆菌%pHY300PLK%电转化
植物乳桿菌%噬澱粉乳桿菌%pHY300PLK%電轉化
식물유간균%서정분유간균%pHY300PLK%전전화
乳杆菌的遗传转化是限制对其遗传操作的关键因素之一.本实验用广宿主质粒pHY300PLK电转化植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)B0080,并优化了转化条件.系统地考察了细胞的生长时期、生长培养基组分、质粒浓度、电击时电场强度、复苏培养基组分等因素对转化效率的影响.选择含5.13%甘氨酸和0.54mol/L蔗糖的MRS培养基制备乳杆菌受体细胞,加入500ng质粒DNA,在电场强度7.41kV/cm电击转化,以含有0.3mol/L蔗糖的MRS培养基复苏培养,获得最佳转化率为3.6×104CFU/μg DNA,比使用初始方法得到的转化率提高了40倍.采用优化后条件,同样实现了pHY300PLK、pBBR1MCS-5对L.amylovoru
s B0112和L.acidophilus B0068的高效转化,为进一步对这些菌株进行基因工程改造奠定了有利的方法学基础.
乳桿菌的遺傳轉化是限製對其遺傳操作的關鍵因素之一.本實驗用廣宿主質粒pHY300PLK電轉化植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)B0080,併優化瞭轉化條件.繫統地攷察瞭細胞的生長時期、生長培養基組分、質粒濃度、電擊時電場彊度、複囌培養基組分等因素對轉化效率的影響.選擇含5.13%甘氨痠和0.54mol/L蔗糖的MRS培養基製備乳桿菌受體細胞,加入500ng質粒DNA,在電場彊度7.41kV/cm電擊轉化,以含有0.3mol/L蔗糖的MRS培養基複囌培養,穫得最佳轉化率為3.6×104CFU/μg DNA,比使用初始方法得到的轉化率提高瞭40倍.採用優化後條件,同樣實現瞭pHY300PLK、pBBR1MCS-5對L.amylovoru
s B0112和L.acidophilus B0068的高效轉化,為進一步對這些菌株進行基因工程改造奠定瞭有利的方法學基礎.
유간균적유전전화시한제대기유전조작적관건인소지일.본실험용엄숙주질립pHY300PLK전전화식물유간균(Lactobacillus plantarum)B0080,병우화료전화조건.계통지고찰료세포적생장시기、생장배양기조분、질립농도、전격시전장강도、복소배양기조분등인소대전화효솔적영향.선택함5.13%감안산화0.54mol/L자당적MRS배양기제비유간균수체세포,가입500ng질립DNA,재전장강도7.41kV/cm전격전화,이함유0.3mol/L자당적MRS배양기복소배양,획득최가전화솔위3.6×104CFU/μg DNA,비사용초시방법득도적전화솔제고료40배.채용우화후조건,동양실현료pHY300PLK、pBBR1MCS-5대L.amylovoru
s B0112화L.acidophilus B0068적고효전화,위진일보대저사균주진행기인공정개조전정료유리적방법학기출.
