山东大学学报(医学版)
山東大學學報(醫學版)
산동대학학보(의학판)
JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2008年
2期
154-158
,共5页
王毓%刘培淑%毛洪鸾%周黎光%孙玉兰%姜虹%王荣
王毓%劉培淑%毛洪鸞%週黎光%孫玉蘭%薑虹%王榮
왕육%류배숙%모홍란%주려광%손옥란%강홍%왕영
RNA干扰%双链RNA%基因%FLIP%卵巢肿瘤
RNA榦擾%雙鏈RNA%基因%FLIP%卵巢腫瘤
RNA간우%쌍련RNA%기인%FLIP%란소종류
目的 探讨靶向FLIP基因的小干扰RNA(siRNA)对人卵巢癌细胞A2780生物学特性的影响及生长抑制作用.方法 设计并体外化学合成FLIP序列特异性双链RNA,在脂质体(Lipofectamice TM2000)介导下转染人卵巢癌细胞株A2780.采用半定量RT-PCR和Westem blot法检测FLIP-siRNAs转染前后A2780细胞FLIP基因mRNA和蛋白表达的变化,并筛选出抑制作用最强的FLIP-siRNA.采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、Annexin-V-PI双染法流式细胞术(KM)分别检测FLIP-siRNA转染时A2780细胞的生长抑制作用和对凋亡的影响.结果 特异性FLIP-siRNAs 片段能有效降低A2780细胞中FLIP的mRNA和蛋白水平(P<0.01),最大抑制半分别为77.4%和66.1%;转染阱siRNA后,A2780细胞的生长活力明显下降(P<0.05),RNA干扰组的细胞凋亡也显著增加(P<0.05).站论靶向FLIP基因的 siRNAs可在转录和翻译水平抑制FLIP基因表达;并可抑制卵巢癌A2780细胞生长,促进其凋亡.
目的 探討靶嚮FLIP基因的小榦擾RNA(siRNA)對人卵巢癌細胞A2780生物學特性的影響及生長抑製作用.方法 設計併體外化學閤成FLIP序列特異性雙鏈RNA,在脂質體(Lipofectamice TM2000)介導下轉染人卵巢癌細胞株A2780.採用半定量RT-PCR和Westem blot法檢測FLIP-siRNAs轉染前後A2780細胞FLIP基因mRNA和蛋白錶達的變化,併篩選齣抑製作用最彊的FLIP-siRNA.採用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法、Annexin-V-PI雙染法流式細胞術(KM)分彆檢測FLIP-siRNA轉染時A2780細胞的生長抑製作用和對凋亡的影響.結果 特異性FLIP-siRNAs 片段能有效降低A2780細胞中FLIP的mRNA和蛋白水平(P<0.01),最大抑製半分彆為77.4%和66.1%;轉染阱siRNA後,A2780細胞的生長活力明顯下降(P<0.05),RNA榦擾組的細胞凋亡也顯著增加(P<0.05).站論靶嚮FLIP基因的 siRNAs可在轉錄和翻譯水平抑製FLIP基因錶達;併可抑製卵巢癌A2780細胞生長,促進其凋亡.
목적 탐토파향FLIP기인적소간우RNA(siRNA)대인란소암세포A2780생물학특성적영향급생장억제작용.방법 설계병체외화학합성FLIP서렬특이성쌍련RNA,재지질체(Lipofectamice TM2000)개도하전염인란소암세포주A2780.채용반정량RT-PCR화Westem blot법검측FLIP-siRNAs전염전후A2780세포FLIP기인mRNA화단백표체적변화,병사선출억제작용최강적FLIP-siRNA.채용사갑기우담서염(MTT)법、Annexin-V-PI쌍염법류식세포술(KM)분별검측FLIP-siRNA전염시A2780세포적생장억제작용화대조망적영향.결과 특이성FLIP-siRNAs 편단능유효강저A2780세포중FLIP적mRNA화단백수평(P<0.01),최대억제반분별위77.4%화66.1%;전염정siRNA후,A2780세포적생장활력명현하강(P<0.05),RNA간우조적세포조망야현저증가(P<0.05).참론파향FLIP기인적 siRNAs가재전록화번역수평억제FLIP기인표체;병가억제란소암A2780세포생장,촉진기조망.