西部医学
西部醫學
서부의학
MEDICAL JOURNAL OF WEST CHINA
2009年
4期
559-561,565
,共4页
袁成良%魏世刚%刘定海%刘利洪%邹自英
袁成良%魏世剛%劉定海%劉利洪%鄒自英
원성량%위세강%류정해%류리홍%추자영
小干扰RNA%树突状细胞%B7%功能
小榦擾RNA%樹突狀細胞%B7%功能
소간우RNA%수돌상세포%B7%공능
目的 探讨体外合成的B7特异性小干扰RNA(siRNA)对树突状细胞(DC)功能的影响.方法 设计并合成B7特异性siRNA,在脂质体的介导下转粢树突状细胞,转染后72h收集细胞,用蛋白印迹法检测B7-1、B7-2蛋白的表达,用ELISPOT检测DC与淋巴细胞共培养后T细胞分泌IFN-γ,用MTT法检测混合淋巴细胞增殖反应和CTL特异性杀伤率,结果 Western Blot结果 显示转染72h后,siRNA1对B7-1蛋白表达的抑制率为(80.9士5.23)%,siRNA2对B7-2蛋白衰达的抑制率为(74.7士4.63)%.经转粢B7-1、B7-2分子特异性siRNA的DC激活后,T淋巴细胞分泌IFN-γ分别为(84.6士23.1)102U/L和(76.7士19.7)10.3U/L明显低于对照组(204.5士46.2)102U/L1各组DC刺激淋巴细胞增殖指数(PI)分别为1.73士0.32和1.53士0.25.也低于对照组4.23士0.74.CTL杀伤实验结果 表明:对照组的特异性杀伤率为(76.4士7.6)%,siRNA1和siRNA2组的特异性杀伤率分别为(14.4士3.6)%和(18.6士4.7)%,低于对照组.结论 B7特异性siRNA可明显抑制树突细胞B7基因的表达,并可降低DC激活T淋巴细胞增殖和CTL的细胞毒性,为进一步研究siRNA诱导免疫耐受和治疗自身免疫性疾病提供了新思路和方法 .
目的 探討體外閤成的B7特異性小榦擾RNA(siRNA)對樹突狀細胞(DC)功能的影響.方法 設計併閤成B7特異性siRNA,在脂質體的介導下轉粢樹突狀細胞,轉染後72h收集細胞,用蛋白印跡法檢測B7-1、B7-2蛋白的錶達,用ELISPOT檢測DC與淋巴細胞共培養後T細胞分泌IFN-γ,用MTT法檢測混閤淋巴細胞增殖反應和CTL特異性殺傷率,結果 Western Blot結果 顯示轉染72h後,siRNA1對B7-1蛋白錶達的抑製率為(80.9士5.23)%,siRNA2對B7-2蛋白衰達的抑製率為(74.7士4.63)%.經轉粢B7-1、B7-2分子特異性siRNA的DC激活後,T淋巴細胞分泌IFN-γ分彆為(84.6士23.1)102U/L和(76.7士19.7)10.3U/L明顯低于對照組(204.5士46.2)102U/L1各組DC刺激淋巴細胞增殖指數(PI)分彆為1.73士0.32和1.53士0.25.也低于對照組4.23士0.74.CTL殺傷實驗結果 錶明:對照組的特異性殺傷率為(76.4士7.6)%,siRNA1和siRNA2組的特異性殺傷率分彆為(14.4士3.6)%和(18.6士4.7)%,低于對照組.結論 B7特異性siRNA可明顯抑製樹突細胞B7基因的錶達,併可降低DC激活T淋巴細胞增殖和CTL的細胞毒性,為進一步研究siRNA誘導免疫耐受和治療自身免疫性疾病提供瞭新思路和方法 .
목적 탐토체외합성적B7특이성소간우RNA(siRNA)대수돌상세포(DC)공능적영향.방법 설계병합성B7특이성siRNA,재지질체적개도하전자수돌상세포,전염후72h수집세포,용단백인적법검측B7-1、B7-2단백적표체,용ELISPOT검측DC여림파세포공배양후T세포분비IFN-γ,용MTT법검측혼합림파세포증식반응화CTL특이성살상솔,결과 Western Blot결과 현시전염72h후,siRNA1대B7-1단백표체적억제솔위(80.9사5.23)%,siRNA2대B7-2단백쇠체적억제솔위(74.7사4.63)%.경전자B7-1、B7-2분자특이성siRNA적DC격활후,T림파세포분비IFN-γ분별위(84.6사23.1)102U/L화(76.7사19.7)10.3U/L명현저우대조조(204.5사46.2)102U/L1각조DC자격림파세포증식지수(PI)분별위1.73사0.32화1.53사0.25.야저우대조조4.23사0.74.CTL살상실험결과 표명:대조조적특이성살상솔위(76.4사7.6)%,siRNA1화siRNA2조적특이성살상솔분별위(14.4사3.6)%화(18.6사4.7)%,저우대조조.결론 B7특이성siRNA가명현억제수돌세포B7기인적표체,병가강저DC격활T림파세포증식화CTL적세포독성,위진일보연구siRNA유도면역내수화치료자신면역성질병제공료신사로화방법 .
