CAJ | 학술논문

为建立检测日本血吸虫感染性钉螺的环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,利用PrimerExplorer V3软件设计4条扩增血吸虫尾蚴钙结合蛋白基因的LAMP引物,酚氯仿法提取血吸虫感染性钉螺、阴性钉螺及肝吸虫感染豆螺基因组DNA进行LAMP反应,LAMP产物经显色、电泳、酶切及DNA序列分析鉴定.在100个阴性钉螺中分别加入20、10、8、6、4、2、1个阳性钉螺,提取DNA后进行LAMP扩增来检测该法的群体检测效果.结果显示,感染性钉螺检测管经显色后呈绿色(阳性),对照组呈棕色(阴性);感染性钉螺LAMP产物经电泳后呈LAMP特征性梯状条带,阴性钉螺及感染肝吸虫豆螺无扩增产物;酶切及序列分析结果显示扩增产物为目的基因;LAMP可检测到100个阴性钉螺中含有阳性钉螺的最低数为2.结果表明,检测日本血吸虫感染性钉螺的LAMP方法特异、简便及具有较好的群体检测效果.
위건립검측일본혈흡충감염성정라적배개도등온확증(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)방법,이용PrimerExplorer V3연건설계4조확증혈흡충미유개결합단백기인적LAMP인물,분록방법제취혈흡충감염성정라、음성정라급간흡충감염두라기인조DNA진행LAMP반응,LAMP산물경현색、전영、매절급DNA서렬분석감정.재100개음성정라중분별가입20、10、8、6、4、2、1개양성정라,제취DNA후진행LAMP확증래검측해법적군체검측효과.결과현시,감염성정라검측관경현색후정록색(양성),대조조정종색(음성);감염성정라LAMP산물경전영후정LAMP특정성제상조대,음성정라급감염간흡충두라무확증산물;매절급서렬분석결과현시확증산물위목적기인;LAMP가검측도100개음성정라중함유양성정라적최저수위2.결과표명,검측일본혈흡충감염성정라적LAMP방법특이、간편급구유교호적군체검측효과.