癌变·畸变·突变
癌變·畸變·突變
암변·기변·돌변
CARCINOGENSES,TERATOGENSIS AND MUTAGENESIS
2009年
5期
372-376
,共5页
邹家杰%张婷%汤树生%陈倩%靳溪%陈开跑%肖希龙
鄒傢傑%張婷%湯樹生%陳倩%靳溪%陳開跑%肖希龍
추가걸%장정%탕수생%진천%근계%진개포%초희룡
喹乙醇%线粒体%活性氧%线粒体膜电位%钙离子
喹乙醇%線粒體%活性氧%線粒體膜電位%鈣離子
규을순%선립체%활성양%선립체막전위%개리자
背景与目的:探讨喹乙醇(olaquindox)对人肝癌细胞(HepG2)线粒体的氧化损伤作用. 材料与方法:用0、200、400和800μg/ml喹乙醇处理HepG2细胞24 h后,采用噻唑蓝(MTT)法确定喹乙醇对HepG2细胞的IC50分子探针2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFDA)和双氢溴乙啶(dihydroethidium,DHE)检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量;罗丹明123检测线粒体膜电位(△Ψm)变化;钙离子荧光探针Fluo-3AM检测胞浆游离钙离子浓度并用定量PCR方法检测线粒体DNA(mtDNA)和核DNA(nDNA)的损伤情况. 结果:随着喹乙醇浓度的增加,HepG2细胞的存活率逐渐降低(P均<0.01),呈时间-剂量-反应关系;不同浓度的喹乙醇作用细胞24 h后,随着喹乙醇浓度的增加细胞内ROS和胞浆游离钙离子浓度显著增加(P<0.05或P<0.01),△Ψm明显降低且呈剂量-反应关系;喹乙醇能引起HepG2细胞mtDNA和nDNA损伤(P均<0.01),且mtDNA损伤程度显著高于nDNA,并呈剂量-反应关系. 结论: 喹乙醇在体外实验中,可诱导HepG2细胞线粒体氧化性损伤.
揹景與目的:探討喹乙醇(olaquindox)對人肝癌細胞(HepG2)線粒體的氧化損傷作用. 材料與方法:用0、200、400和800μg/ml喹乙醇處理HepG2細胞24 h後,採用噻唑藍(MTT)法確定喹乙醇對HepG2細胞的IC50分子探針2',7'-二氯熒光黃雙乙痠鹽(2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFDA)和雙氫溴乙啶(dihydroethidium,DHE)檢測細胞內活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量;囉丹明123檢測線粒體膜電位(△Ψm)變化;鈣離子熒光探針Fluo-3AM檢測胞漿遊離鈣離子濃度併用定量PCR方法檢測線粒體DNA(mtDNA)和覈DNA(nDNA)的損傷情況. 結果:隨著喹乙醇濃度的增加,HepG2細胞的存活率逐漸降低(P均<0.01),呈時間-劑量-反應關繫;不同濃度的喹乙醇作用細胞24 h後,隨著喹乙醇濃度的增加細胞內ROS和胞漿遊離鈣離子濃度顯著增加(P<0.05或P<0.01),△Ψm明顯降低且呈劑量-反應關繫;喹乙醇能引起HepG2細胞mtDNA和nDNA損傷(P均<0.01),且mtDNA損傷程度顯著高于nDNA,併呈劑量-反應關繫. 結論: 喹乙醇在體外實驗中,可誘導HepG2細胞線粒體氧化性損傷.
배경여목적:탐토규을순(olaquindox)대인간암세포(HepG2)선립체적양화손상작용. 재료여방법:용0、200、400화800μg/ml규을순처리HepG2세포24 h후,채용새서람(MTT)법학정규을순대HepG2세포적IC50분자탐침2',7'-이록형광황쌍을산염(2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFDA)화쌍경추을정(dihydroethidium,DHE)검측세포내활성양(reactive oxygen species,ROS)함량;라단명123검측선립체막전위(△Ψm)변화;개리자형광탐침Fluo-3AM검측포장유리개리자농도병용정량PCR방법검측선립체DNA(mtDNA)화핵DNA(nDNA)적손상정황. 결과:수착규을순농도적증가,HepG2세포적존활솔축점강저(P균<0.01),정시간-제량-반응관계;불동농도적규을순작용세포24 h후,수착규을순농도적증가세포내ROS화포장유리개리자농도현저증가(P<0.05혹P<0.01),△Ψm명현강저차정제량-반응관계;규을순능인기HepG2세포mtDNA화nDNA손상(P균<0.01),차mtDNA손상정도현저고우nDNA,병정제량-반응관계. 결론: 규을순재체외실험중,가유도HepG2세포선립체양화성손상.
