水产科学
水產科學
수산과학
FISHERIES SCIENCE
2010年
10期
616-619
,共4页
青蟹%磁珠富集法%微卫星DNA%特征分析
青蟹%磁珠富集法%微衛星DNA%特徵分析
청해%자주부집법%미위성DNA%특정분석
利用磁珠富集法,结合生物素标记的(CA)16寡核苷酸探针从青蟹基因组MboI酶切片段中筛选微卫星DNA序列.将得到的片段与pGEM-T Easy载体连接后转化克隆构建微卫星富集文库.经PCR筛选检测,对89个阳性克隆进行测序,其中52个克隆中含有64个微卫星,完全型占87.50%,重复次数超过11次的占78.12%.根据所获微卫星的侧翼序列设计并合成了30对引物,通过优化PCR反应条件,并在35只青蟹个体中进行PCR扩增检测,最终获得了10对具有多态性的引物,为进一步开展青蟹遗传多样性分析、遗传图谱构建等研究提供了基础资料.
利用磁珠富集法,結閤生物素標記的(CA)16寡覈苷痠探針從青蟹基因組MboI酶切片段中篩選微衛星DNA序列.將得到的片段與pGEM-T Easy載體連接後轉化剋隆構建微衛星富集文庫.經PCR篩選檢測,對89箇暘性剋隆進行測序,其中52箇剋隆中含有64箇微衛星,完全型佔87.50%,重複次數超過11次的佔78.12%.根據所穫微衛星的側翼序列設計併閤成瞭30對引物,通過優化PCR反應條件,併在35隻青蟹箇體中進行PCR擴增檢測,最終穫得瞭10對具有多態性的引物,為進一步開展青蟹遺傳多樣性分析、遺傳圖譜構建等研究提供瞭基礎資料.
이용자주부집법,결합생물소표기적(CA)16과핵감산탐침종청해기인조MboI매절편단중사선미위성DNA서렬.장득도적편단여pGEM-T Easy재체련접후전화극륭구건미위성부집문고.경PCR사선검측,대89개양성극륭진행측서,기중52개극륭중함유64개미위성,완전형점87.50%,중복차수초과11차적점78.12%.근거소획미위성적측익서렬설계병합성료30대인물,통과우화PCR반응조건,병재35지청해개체중진행PCR확증검측,최종획득료10대구유다태성적인물,위진일보개전청해유전다양성분석、유전도보구건등연구제공료기출자료.
