中华微生物学和免疫学杂志
中華微生物學和免疫學雜誌
중화미생물학화면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2005年
5期
375-378
,共4页
潘乐康%杨彦卓%佐野夏枝%白井诚
潘樂康%楊彥卓%佐野夏枝%白井誠
반악강%양언탁%좌야하지%백정성
位点特异性重组%Sre蛋白%分子内重组系统
位點特異性重組%Sre蛋白%分子內重組繫統
위점특이성중조%Sre단백%분자내중조계통
目的证明放线菌噬菌体重组酶Sre在大肠杆菌细胞内介导高效的位点特异性重组. 方法在大肠杆菌内构建分子内重组分析系统.质粒pBZP含有方向相同的attB和attP位点,分别位于lacZ基因的两侧.将pBZP电击导入含有sre基因的大肠杆菌细胞. 结果重组的发生导致lacZ基因的切除,使含有X-Gal成分的培养基上细菌菌落从蓝色变成白色.整合后DNA经酶切、PCR和DNA测序证实.发生100%重组率的attB和attP最小片段分别是50 bp和47 bp. 结论在大肠杆菌宿主环境中放线菌噬菌体重组酶Sre高效催化位点特异性重组.本分子内重组分析系统是一个简便而有效的方法.
目的證明放線菌噬菌體重組酶Sre在大腸桿菌細胞內介導高效的位點特異性重組. 方法在大腸桿菌內構建分子內重組分析繫統.質粒pBZP含有方嚮相同的attB和attP位點,分彆位于lacZ基因的兩側.將pBZP電擊導入含有sre基因的大腸桿菌細胞. 結果重組的髮生導緻lacZ基因的切除,使含有X-Gal成分的培養基上細菌菌落從藍色變成白色.整閤後DNA經酶切、PCR和DNA測序證實.髮生100%重組率的attB和attP最小片段分彆是50 bp和47 bp. 結論在大腸桿菌宿主環境中放線菌噬菌體重組酶Sre高效催化位點特異性重組.本分子內重組分析繫統是一箇簡便而有效的方法.
목적증명방선균서균체중조매Sre재대장간균세포내개도고효적위점특이성중조. 방법재대장간균내구건분자내중조분석계통.질립pBZP함유방향상동적attB화attP위점,분별위우lacZ기인적량측.장pBZP전격도입함유sre기인적대장간균세포. 결과중조적발생도치lacZ기인적절제,사함유X-Gal성분적배양기상세균균락종람색변성백색.정합후DNA경매절、PCR화DNA측서증실.발생100%중조솔적attB화attP최소편단분별시50 bp화47 bp. 결론재대장간균숙주배경중방선균서균체중조매Sre고효최화위점특이성중조.본분자내중조분석계통시일개간편이유효적방법.
