中国实验动物学报
中國實驗動物學報
중국실험동물학보
ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
2003年
3期
177-180
,共4页
吕茂民%贾莉玮%斯日古愣%杨文斌%杨姝%章金刚
呂茂民%賈莉瑋%斯日古愣%楊文斌%楊姝%章金剛
려무민%가리위%사일고릉%양문빈%양주%장금강
细胞,HEK293%模型,动物%感染%猪,内源性逆转录病毒
細胞,HEK293%模型,動物%感染%豬,內源性逆轉錄病毒
세포,HEK293%모형,동물%감염%저,내원성역전록병독
目的建立猪内源性反转录病毒感染HEK293细胞的模型,验证PERV在体外对人源细胞的感染性,并进一步研究PERV的生物学特性.方法将G418抗性的HEK293细胞与猪源PK-15细胞共培养,6周后,用含有600 μg/ml G418的选择性培养基对共培养细胞进行加压筛选,用以除去共培养体系中的PK-15细胞;然后应用PCR及RT-PCR的方法对所制备的感染细胞模型进行系统鉴定.结果经6周共培养及3周加压筛选后,细胞的形态、生长速度及折光性均未见明显变化;PCR及RT-PCR鉴定表明,筛选后的共培养体系中已没有PK-15细胞的存在;PERV特异性检测方法检测显示,该细胞模型的DNA中已有PERV的整合且有PERV特异性mRNA的表达.结论本实验成功建立了PERV感染HEK293细胞的模型,证实了PERV在体外对人源细胞具有感染性;为PERV生物学特性的研究奠定了基础.
目的建立豬內源性反轉錄病毒感染HEK293細胞的模型,驗證PERV在體外對人源細胞的感染性,併進一步研究PERV的生物學特性.方法將G418抗性的HEK293細胞與豬源PK-15細胞共培養,6週後,用含有600 μg/ml G418的選擇性培養基對共培養細胞進行加壓篩選,用以除去共培養體繫中的PK-15細胞;然後應用PCR及RT-PCR的方法對所製備的感染細胞模型進行繫統鑒定.結果經6週共培養及3週加壓篩選後,細胞的形態、生長速度及摺光性均未見明顯變化;PCR及RT-PCR鑒定錶明,篩選後的共培養體繫中已沒有PK-15細胞的存在;PERV特異性檢測方法檢測顯示,該細胞模型的DNA中已有PERV的整閤且有PERV特異性mRNA的錶達.結論本實驗成功建立瞭PERV感染HEK293細胞的模型,證實瞭PERV在體外對人源細胞具有感染性;為PERV生物學特性的研究奠定瞭基礎.
목적건립저내원성반전록병독감염HEK293세포적모형,험증PERV재체외대인원세포적감염성,병진일보연구PERV적생물학특성.방법장G418항성적HEK293세포여저원PK-15세포공배양,6주후,용함유600 μg/ml G418적선택성배양기대공배양세포진행가압사선,용이제거공배양체계중적PK-15세포;연후응용PCR급RT-PCR적방법대소제비적감염세포모형진행계통감정.결과경6주공배양급3주가압사선후,세포적형태、생장속도급절광성균미견명현변화;PCR급RT-PCR감정표명,사선후적공배양체계중이몰유PK-15세포적존재;PERV특이성검측방법검측현시,해세포모형적DNA중이유PERV적정합차유PERV특이성mRNA적표체.결론본실험성공건립료PERV감염HEK293세포적모형,증실료PERV재체외대인원세포구유감염성;위PERV생물학특성적연구전정료기출.
