CAJ | 학술논문

目的:探讨人脐血、外周血内皮祖细胞(EPCs)体外分离、纯化、诱导扩增和分化为内皮细胞的可行性,并对两者分化成内皮细胞的能力进行比较.方法:新鲜脐血和健康成年人的外周血,Ficoll密度梯度离心法得单个核细胞,磁珠分选方法(MACS)分离脐血CD34+单个核细胞(MNCCD34+).脐血单个核细胞(CBMC)、外周血单个核细胞(PBMC)和MNCCD34+在M-199培养基体外培养,血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导EPCs增殖和分化.采用细胞形态学观察比较细胞克隆形成率的区别,流式细胞仪检测不同来源的EPCs分化后CD31阳性细胞率.结果:MNCCD34+培养3 d后,细胞克隆形成率为(24.25±6.5)/(3×107)细胞; CBMC贴壁细胞培养3 d后,为(103.00±10.10)/(3×107)细胞;PBMC贴壁细胞培养3 d后,为(74.25±5.44)/(3×107)细胞.CBMC分化形成的贴壁细胞和细胞簇数目多于PBMC(P《0.05), 但单个核细胞分化形成的克隆率均明显高于MNCCD34+细胞(均P《0.05).细胞培养10 d后CD31阳性率为:CBMC为(76.24±16.54)%,PBMC为(82.2±9.0)%,MNCCD34+为(70.03±10.27)%,MNCCD34-仅为(36.5±11.78)%.结论:相似数目的细胞,CD34+细胞单独培养形成的贴壁细胞和细胞簇数目明显少于CBMC和PBMC(均P《0.05).培养10 d后CD31阳性细胞率则差异无统计学意义(P》0.05),提示不同来源的EPCs分化率无显著区别,主要来自CD34+细胞群.
목적:탐토인제혈、외주혈내피조세포(EPCs)체외분리、순화、유도확증화분화위내피세포적가행성,병대량자분화성내피세포적능력진행비교.방법:신선제혈화건강성년인적외주혈,Ficoll밀도제도리심법득단개핵세포,자주분선방법(MACS)분리제혈CD34+단개핵세포(MNCCD34+).제혈단개핵세포(CBMC)、외주혈단개핵세포(PBMC)화MNCCD34+재M-199배양기체외배양,혈관내피생장인자(VEGF)、감성성섬유세포생장인자(bFGF)유도EPCs증식화분화.채용세포형태학관찰비교세포극륭형성솔적구별,류식세포의검측불동래원적EPCs분화후CD31양성세포솔.결과:MNCCD34+배양3 d후,세포극륭형성솔위(24.25±6.5)/(3×107)세포; CBMC첩벽세포배양3 d후,위(103.00±10.10)/(3×107)세포;PBMC첩벽세포배양3 d후,위(74.25±5.44)/(3×107)세포.CBMC분화형성적첩벽세포화세포족수목다우PBMC(P《0.05), 단단개핵세포분화형성적극륭솔균명현고우MNCCD34+세포(균P《0.05).세포배양10 d후CD31양성솔위:CBMC위(76.24±16.54)%,PBMC위(82.2±9.0)%,MNCCD34+위(70.03±10.27)%,MNCCD34-부위(36.5±11.78)%.결론:상사수목적세포,CD34+세포단독배양형성적첩벽세포화세포족수목명현소우CBMC화PBMC(균P《0.05).배양10 d후CD31양성세포솔칙차이무통계학의의(P》0.05),제시불동래원적EPCs분화솔무현저구별,주요래자CD34+세포군.