中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2006年
12期
1100-1103,1134
,共5页
丁银巧%张剑锐%张云霞%曹振%孙明%田克恭
丁銀巧%張劍銳%張雲霞%曹振%孫明%田剋恭
정은교%장검예%장운하%조진%손명%전극공
口蹄疫病毒%非结构蛋白%毕赤酵母%真核表达
口蹄疫病毒%非結構蛋白%畢赤酵母%真覈錶達
구제역병독%비결구단백%필적효모%진핵표체
目的 利用毕赤酵母系统表达口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白3AB,用于FMDV感染与疫苗免疫动物的鉴别诊断和3AB蛋白功能研究.方法 采用PCR方法从Pgem-T-Easy-3ABC质粒中扩增3AB基因,将其插入pPICZαA酵母表达载体中,构建的重组表达质粒线性化后电转入毕赤酵母GS115中,在0.5%甲醇诱导下表达3AB蛋白,运用SDS-PAGE和ELISA方法鉴定表达蛋白.结果 成功构建了pPICZαA-3AB重组酵母表达质粒,并转化入毕赤酵母GS115中,SDS-PAGE和ELISA鉴定结果表明,重组酵母菌株表达出约19kD的3AB蛋白,与针对FMDV的3AB蛋白单克隆抗体有特异性反应.结论 在毕赤酵母中成功表达了FMDV 3AB蛋白,与抗FMDV 3AB蛋白单克隆抗体具有反应性.
目的 利用畢赤酵母繫統錶達口蹄疫病毒(FMDV)非結構蛋白3AB,用于FMDV感染與疫苗免疫動物的鑒彆診斷和3AB蛋白功能研究.方法 採用PCR方法從Pgem-T-Easy-3ABC質粒中擴增3AB基因,將其插入pPICZαA酵母錶達載體中,構建的重組錶達質粒線性化後電轉入畢赤酵母GS115中,在0.5%甲醇誘導下錶達3AB蛋白,運用SDS-PAGE和ELISA方法鑒定錶達蛋白.結果 成功構建瞭pPICZαA-3AB重組酵母錶達質粒,併轉化入畢赤酵母GS115中,SDS-PAGE和ELISA鑒定結果錶明,重組酵母菌株錶達齣約19kD的3AB蛋白,與針對FMDV的3AB蛋白單剋隆抗體有特異性反應.結論 在畢赤酵母中成功錶達瞭FMDV 3AB蛋白,與抗FMDV 3AB蛋白單剋隆抗體具有反應性.
목적 이용필적효모계통표체구제역병독(FMDV)비결구단백3AB,용우FMDV감염여역묘면역동물적감별진단화3AB단백공능연구.방법 채용PCR방법종Pgem-T-Easy-3ABC질립중확증3AB기인,장기삽입pPICZαA효모표체재체중,구건적중조표체질립선성화후전전입필적효모GS115중,재0.5%갑순유도하표체3AB단백,운용SDS-PAGE화ELISA방법감정표체단백.결과 성공구건료pPICZαA-3AB중조효모표체질립,병전화입필적효모GS115중,SDS-PAGE화ELISA감정결과표명,중조효모균주표체출약19kD적3AB단백,여침대FMDV적3AB단백단극륭항체유특이성반응.결론 재필적효모중성공표체료FMDV 3AB단백,여항FMDV 3AB단백단극륭항체구유반응성.
