西安交通大学学报（医学版）
西安交通大學學報（醫學版）
서안교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF XI'AN JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2007年
4期
458-461
,共4页
马文静%何韶衡%周艳春%陈玉珍%黄阗%方泽漫%陈霖霏
馬文靜%何韶衡%週豔春%陳玉珍%黃闐%方澤漫%陳霖霏
마문정%하소형%주염춘%진옥진%황전%방택만%진림비
蛋白酶活化受体-1%单克隆抗体%酶联免疫吸附试验
蛋白酶活化受體-1%單剋隆抗體%酶聯免疫吸附試驗
단백매활화수체-1%단극륭항체%매련면역흡부시험
目的 制备蛋白酶活化受体-1(PAR-1)单克隆抗体(mAb).方法 以PAR-1特异性片段为免疫原(13肽)免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗PAR-1 mAb.采用捕获酶联免疫吸附试验(capture ELISA)鉴定mAb的Ig亚类;通过ELISA、Dot blot、免疫组化染色法、流式细胞仪分析、激光共聚焦显微镜技术鉴定mAb的特异性.结果 获得2株可稳定分泌抗PAR-1 mAb的杂交瘤细胞,其亚型分别为IgM、IgG2b.免疫组化染色表明,mAb与人扁桃体、结肠组织中的淋巴细胞、包皮组织中的成纤维细胞、肺组织中的巨噬细胞反应呈阳性.流式细胞仪分析显示,2株mAb与人肺腺癌细胞系A549细胞胞浆内及细胞膜上的PAR-1均呈阳性反应.激光共聚焦扫描显微镜观察,荧光标记的阳性反应物在A549细胞胞浆内及细胞膜上均可见.结论 成功地制备出抗PAR-1 mAb,为进一步研究炎症性疾病提供有用的试剂.
目的 製備蛋白酶活化受體-1(PAR-1)單剋隆抗體(mAb).方法 以PAR-1特異性片段為免疫原(13肽)免疫BALB/c小鼠,運用雜交瘤技術製備抗PAR-1 mAb.採用捕穫酶聯免疫吸附試驗(capture ELISA)鑒定mAb的Ig亞類;通過ELISA、Dot blot、免疫組化染色法、流式細胞儀分析、激光共聚焦顯微鏡技術鑒定mAb的特異性.結果 穫得2株可穩定分泌抗PAR-1 mAb的雜交瘤細胞,其亞型分彆為IgM、IgG2b.免疫組化染色錶明,mAb與人扁桃體、結腸組織中的淋巴細胞、包皮組織中的成纖維細胞、肺組織中的巨噬細胞反應呈暘性.流式細胞儀分析顯示,2株mAb與人肺腺癌細胞繫A549細胞胞漿內及細胞膜上的PAR-1均呈暘性反應.激光共聚焦掃描顯微鏡觀察,熒光標記的暘性反應物在A549細胞胞漿內及細胞膜上均可見.結論 成功地製備齣抗PAR-1 mAb,為進一步研究炎癥性疾病提供有用的試劑.
목적 제비단백매활화수체-1(PAR-1)단극륭항체(mAb).방법 이PAR-1특이성편단위면역원(13태)면역BALB/c소서,운용잡교류기술제비항PAR-1 mAb.채용포획매련면역흡부시험(capture ELISA)감정mAb적Ig아류;통과ELISA、Dot blot、면역조화염색법、류식세포의분석、격광공취초현미경기술감정mAb적특이성.결과 획득2주가은정분비항PAR-1 mAb적잡교류세포,기아형분별위IgM、IgG2b.면역조화염색표명,mAb여인편도체、결장조직중적림파세포、포피조직중적성섬유세포、폐조직중적거서세포반응정양성.류식세포의분석현시,2주mAb여인폐선암세포계A549세포포장내급세포막상적PAR-1균정양성반응.격광공취초소묘현미경관찰,형광표기적양성반응물재A549세포포장내급세포막상균가견.결론 성공지제비출항PAR-1 mAb,위진일보연구염증성질병제공유용적시제.
