基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2011年
4期
371-376
,共6页
余红梅%李琪%尤列·皮尔曼%维克多·科罗索夫%周向东
餘紅梅%李琪%尤列·皮爾曼%維剋多·科囉索伕%週嚮東
여홍매%리기%우렬·피이만%유극다·과라색부%주향동
脂多糖%内生多肽%Elafin%黏蛋白%核转录因子-κB
脂多糖%內生多肽%Elafin%黏蛋白%覈轉錄因子-κB
지다당%내생다태%Elafin%점단백%핵전록인자-κB
目的 探讨天然内生多肽Elafin对脂多糖诱导的气道黏液高分泌的调节机制.方法 构建人Elafin重组质粒pEGFP-N1-Elafin,转染正常人支气管上皮细胞HBE16,给予脂多糖(LPS)刺激,激光共聚焦扫描显微镜检测Elafin蛋白含量,Western blot法检测IKBa蛋白含量;荧光素酶报告基因检测系统测定核转录因子-κB(NF-κB)活性;RT-PCR检测Elafin和黏蛋白(MUC)SAC mRNA表达水平;ELISA法分析MUCSAC蛋白相对含量.结果 成功构建内生多肽Elafin真核表达载体pEGFP-N1-Elafin并转染HBEi6细胞.转染重组Elafin后Elafin蛋白含量及mRNA水平明显增加.与对照组相比,LPS刺激组IκBα蛋白含量降低,NF-κB相对活性明显增强,MUC5AC蛋白含量及mRNA水平也显著增加.转染重组Elafin后再予以LPS刺激,与单纯LPS刺激组相比,IκBα蛋白含量明显增加,NF-κB相对活性显著降低,MUCSAC蛋白含量及mRNA水平也明显降低.结论 天然内生多肽Elafin重组气道上皮可下调NF-κB的活性,降低脂多糖诱导的气道黏液高分泌.
目的 探討天然內生多肽Elafin對脂多糖誘導的氣道黏液高分泌的調節機製.方法 構建人Elafin重組質粒pEGFP-N1-Elafin,轉染正常人支氣管上皮細胞HBE16,給予脂多糖(LPS)刺激,激光共聚焦掃描顯微鏡檢測Elafin蛋白含量,Western blot法檢測IKBa蛋白含量;熒光素酶報告基因檢測繫統測定覈轉錄因子-κB(NF-κB)活性;RT-PCR檢測Elafin和黏蛋白(MUC)SAC mRNA錶達水平;ELISA法分析MUCSAC蛋白相對含量.結果 成功構建內生多肽Elafin真覈錶達載體pEGFP-N1-Elafin併轉染HBEi6細胞.轉染重組Elafin後Elafin蛋白含量及mRNA水平明顯增加.與對照組相比,LPS刺激組IκBα蛋白含量降低,NF-κB相對活性明顯增彊,MUC5AC蛋白含量及mRNA水平也顯著增加.轉染重組Elafin後再予以LPS刺激,與單純LPS刺激組相比,IκBα蛋白含量明顯增加,NF-κB相對活性顯著降低,MUCSAC蛋白含量及mRNA水平也明顯降低.結論 天然內生多肽Elafin重組氣道上皮可下調NF-κB的活性,降低脂多糖誘導的氣道黏液高分泌.
목적 탐토천연내생다태Elafin대지다당유도적기도점액고분비적조절궤제.방법 구건인Elafin중조질립pEGFP-N1-Elafin,전염정상인지기관상피세포HBE16,급여지다당(LPS)자격,격광공취초소묘현미경검측Elafin단백함량,Western blot법검측IKBa단백함량;형광소매보고기인검측계통측정핵전록인자-κB(NF-κB)활성;RT-PCR검측Elafin화점단백(MUC)SAC mRNA표체수평;ELISA법분석MUCSAC단백상대함량.결과 성공구건내생다태Elafin진핵표체재체pEGFP-N1-Elafin병전염HBEi6세포.전염중조Elafin후Elafin단백함량급mRNA수평명현증가.여대조조상비,LPS자격조IκBα단백함량강저,NF-κB상대활성명현증강,MUC5AC단백함량급mRNA수평야현저증가.전염중조Elafin후재여이LPS자격,여단순LPS자격조상비,IκBα단백함량명현증가,NF-κB상대활성현저강저,MUCSAC단백함량급mRNA수평야명현강저.결론 천연내생다태Elafin중조기도상피가하조NF-κB적활성,강저지다당유도적기도점액고분비.
