中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2011年
11期
83-86
,共4页
罗飞%李宇琴%周洁%南文龙%陆明哲%陈义平
囉飛%李宇琴%週潔%南文龍%陸明哲%陳義平
라비%리우금%주길%남문룡%륙명철%진의평
伪狂犬病病毒%gD糖蛋白%主要抗原表位%原核表达
偽狂犬病病毒%gD糖蛋白%主要抗原錶位%原覈錶達
위광견병병독%gD당단백%주요항원표위%원핵표체
本试验通过PCR方法以猪伪狂犬病病毒SD株的基因组DNA为模板扩增得到了含gD主要抗原表位编码区的片段,将该PCR产物克隆到pGEM-T载体上,酶切后插入原核表达载体pET-32a的T7启动子下游.构建的重组质粒pET-gD经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21( DE3)中获得了高效表达.SDS-PAGE结果显示,表达产物分子质量约为45.2 ku,主要以包涵体形式存在.表达产物用His亲和层析柱纯化.Western blotting结果显示,该纯化蛋白能与猪伪狂犬病病毒抗体阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的抗原反应性,可以作为猪血清伪狂犬病病毒抗体诊断用抗原.
本試驗通過PCR方法以豬偽狂犬病病毒SD株的基因組DNA為模闆擴增得到瞭含gD主要抗原錶位編碼區的片段,將該PCR產物剋隆到pGEM-T載體上,酶切後插入原覈錶達載體pET-32a的T7啟動子下遊.構建的重組質粒pET-gD經IPTG誘導,在大腸桿菌BL21( DE3)中穫得瞭高效錶達.SDS-PAGE結果顯示,錶達產物分子質量約為45.2 ku,主要以包涵體形式存在.錶達產物用His親和層析柱純化.Western blotting結果顯示,該純化蛋白能與豬偽狂犬病病毒抗體暘性血清髮生特異性反應,錶明該重組蛋白具有良好的抗原反應性,可以作為豬血清偽狂犬病病毒抗體診斷用抗原.
본시험통과PCR방법이저위광견병병독SD주적기인조DNA위모판확증득도료함gD주요항원표위편마구적편단,장해PCR산물극륭도pGEM-T재체상,매절후삽입원핵표체재체pET-32a적T7계동자하유.구건적중조질립pET-gD경IPTG유도,재대장간균BL21( DE3)중획득료고효표체.SDS-PAGE결과현시,표체산물분자질량약위45.2 ku,주요이포함체형식존재.표체산물용His친화층석주순화.Western blotting결과현시,해순화단백능여저위광견병병독항체양성혈청발생특이성반응,표명해중조단백구유량호적항원반응성,가이작위저혈청위광견병병독항체진단용항원.
