新生隐球菌MIS1基因的siRNA表达载体的构建及鉴定
신생은구균MIS1기인적siRNA표체재체적구건급감정
Construction and identification of siRNA expression vector targeting MIS1 gene in Cryptococcus neoformans
  • 万方数据
    中国真菌学杂志 중국진균학잡지
    CHINESE JOURNAL OF MYCOLOGY
    2012年 1期 17-19,23 ,共4页

    李秀丽%田媛%史玉玲%顾俊瑛%李晓建%刘至昱%马越娥%高飞%王茠茠

    리수려%전원%사옥령%고준영%리효건%류지욱%마월아%고비%왕호호

    新生隐球菌%RNA干扰%MIS1 新生隱毬菌%RNA榦擾%MIS1
    신생은구균%RNA간우%MIS1
    目的 构建靶向新生隐球菌MIS1基因的siRNA重组表达载体质粒,并进行鉴定.方法 根据GenBank的MIS1基因序列,按照载体要求设计单链引物,克隆到空载体psilencer4.I-CMV neo中,经过LiAc化学法将重组质粒转染到新生隐球菌细胞中并用G418筛选,利用real time PCR鉴定阳性细胞的MIS1基因水平.结果 重组表达质粒Psilencer4,1-CMV-si-MIS1经PCR、双酶切及测序鉴定,结果证明重组表达载体构建成功,其能在mRNA水平显著抑制MIS1的表达.结论 已成功构建新生隐球菌MIS1基因的siRNA表达载体,为深入研究MIsl在隐球菌相关疾病的发生及发展中的作用提供了技术手段.
    목적 구건파향신생은구균MIS1기인적siRNA중조표체재체질립,병진행감정.방법 근거GenBank적MIS1기인서렬,안조재체요구설계단련인물,극륭도공재체psilencer4.I-CMV neo중,경과LiAc화학법장중조질립전염도신생은구균세포중병용G418사선,이용real time PCR감정양성세포적MIS1기인수평.결과 중조표체질립Psilencer4,1-CMV-si-MIS1경PCR、쌍매절급측서감정,결과증명중조표체재체구건성공,기능재mRNA수평현저억제MIS1적표체.결론 이성공구건신생은구균MIS1기인적siRNA표체재체,위심입연구MIsl재은구균상관질병적발생급발전중적작용제공료기술수단.
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