CAJ | 학술논문

用增殖与浓缩后的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)分别免疫健康牛犊和家兔,制备牛抗BVDV和兔抗BVDV超免疫血清,并用层析法纯化牛抗BVDV IgG和兔抗BVDV IgG,建立了检测BVDV的双抗体夹心ELISA快速检测方法.结果表明:该检测方法的最佳反应条件为:牛抗BVDV IgG包被浓度为100 μg/mL,兔抗BVDV IgG最佳工作浓度为50 μg/mL,样品反应时间为90 min,酶标抗体工作浓度为1∶8 000,以D490nm≥0.177作为阳性判定标准.该ELISA检测方法的重复性CV小于10％,最低检测限为1.87 μg/mL,与牛轮状病毒、牛冠状病毒、猪瘟病毒、犊牛大肠杆菌和沙门菌等病原无交叉反应,该ELISA试剂在室温下至少可保存6个月.用该ELISA方法和IDEXX公司抗原检测试剂盒对甘肃省不同地区牛场156份临床粪便样品进行了检测,阳性检出率分别为17.3％和16.7％.表明本试验建立的ELlSA方法特异性强、敏感性高且重复性好,可用于BVDV的快速检测.
용증식여농축후적우병독성복사병독(BVDV)분별면역건강우독화가토,제비우항BVDV화토항BVDV초면역혈청,병용층석법순화우항BVDV IgG화토항BVDV IgG,건립료검측BVDV적쌍항체협심ELISA쾌속검측방법.결과표명:해검측방법적최가반응조건위:우항BVDV IgG포피농도위100 μg/mL,토항BVDV IgG최가공작농도위50 μg/mL,양품반응시간위90 min,매표항체공작농도위1∶8 000,이D490nm≥0.177작위양성판정표준.해ELISA검측방법적중복성CV소우10％,최저검측한위1.87 μg/mL,여우륜상병독、우관상병독、저온병독、독우대장간균화사문균등병원무교차반응,해ELISA시제재실온하지소가보존6개월.용해ELISA방법화IDEXX공사항원검측시제합대감숙성불동지구우장156빈림상분편양품진행료검측,양성검출솔분별위17.3％화16.7％.표명본시험건립적ELlSA방법특이성강、민감성고차중복성호,가용우BVDV적쾌속검측.