基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2012年
6期
618-622
,共5页
吴燕%曹炬%黄世峰%文阳安%张莉萍
吳燕%曹炬%黃世峰%文暘安%張莉萍
오연%조거%황세봉%문양안%장리평
HCV核心蛋白%HepG2细胞%MicroRNAs%基因芯片
HCV覈心蛋白%HepG2細胞%MicroRNAs%基因芯片
HCV핵심단백%HepG2세포%MicroRNAs%기인심편
目的 分析HCV核心蛋白(HCV-Core)对HepG2细胞microRNA表达谱的影响.方法 将构建好的重组真核表达质粒pCDNA3.1(+)/HCV-Core用脂质体转染HepG2细胞,经G418筛选得到稳定转染HCV-Core的HepG2细胞,命名为HepG2-HCV Core细胞系.然后用反转录聚合酶链反应(RT-PCR),细胞免疫荧光和Western blot对HCV核心蛋白在HepG2细胞里mRNA和蛋白水平的表达情况进行验证.利用博奥生物公司的miRNA Array基因芯片,分析稳定表达HCV核心蛋白的HepG2细胞和转染空质粒pCDNA3.1(+)的HepG2细胞二者microRNA表达谱的差异,最后用Taqman探针荧光定量PCR法进行验证.结果 感染HCV-Core后,HepG2细胞表达有差异的microRNA有8种,用Taqman探针荧光定最PCR法进行分析,发现HCV核心蛋白可以上调miR-29、miR-146a、miR-149、miR-192、miR-221、miR-222和miR-193b,下调miR-196a.结论 HCV核心蛋白可以诱导肝细胞microRNA表达谱发生改变,在肝癌发生发展过程中发挥重要作用.
目的 分析HCV覈心蛋白(HCV-Core)對HepG2細胞microRNA錶達譜的影響.方法 將構建好的重組真覈錶達質粒pCDNA3.1(+)/HCV-Core用脂質體轉染HepG2細胞,經G418篩選得到穩定轉染HCV-Core的HepG2細胞,命名為HepG2-HCV Core細胞繫.然後用反轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR),細胞免疫熒光和Western blot對HCV覈心蛋白在HepG2細胞裏mRNA和蛋白水平的錶達情況進行驗證.利用博奧生物公司的miRNA Array基因芯片,分析穩定錶達HCV覈心蛋白的HepG2細胞和轉染空質粒pCDNA3.1(+)的HepG2細胞二者microRNA錶達譜的差異,最後用Taqman探針熒光定量PCR法進行驗證.結果 感染HCV-Core後,HepG2細胞錶達有差異的microRNA有8種,用Taqman探針熒光定最PCR法進行分析,髮現HCV覈心蛋白可以上調miR-29、miR-146a、miR-149、miR-192、miR-221、miR-222和miR-193b,下調miR-196a.結論 HCV覈心蛋白可以誘導肝細胞microRNA錶達譜髮生改變,在肝癌髮生髮展過程中髮揮重要作用.
목적 분석HCV핵심단백(HCV-Core)대HepG2세포microRNA표체보적영향.방법 장구건호적중조진핵표체질립pCDNA3.1(+)/HCV-Core용지질체전염HepG2세포,경G418사선득도은정전염HCV-Core적HepG2세포,명명위HepG2-HCV Core세포계.연후용반전록취합매련반응(RT-PCR),세포면역형광화Western blot대HCV핵심단백재HepG2세포리mRNA화단백수평적표체정황진행험증.이용박오생물공사적miRNA Array기인심편,분석은정표체HCV핵심단백적HepG2세포화전염공질립pCDNA3.1(+)적HepG2세포이자microRNA표체보적차이,최후용Taqman탐침형광정량PCR법진행험증.결과 감염HCV-Core후,HepG2세포표체유차이적microRNA유8충,용Taqman탐침형광정최PCR법진행분석,발현HCV핵심단백가이상조miR-29、miR-146a、miR-149、miR-192、miR-221、miR-222화miR-193b,하조miR-196a.결론 HCV핵심단백가이유도간세포microRNA표체보발생개변,재간암발생발전과정중발휘중요작용.
