中国地方病学杂志
中國地方病學雜誌
중국지방병학잡지
CHINESE JOURNAL OF ENDEMIOLOGY
2005年
2期
164-166
,共3页
杨歌德%周宏博%刘长振%王爱民
楊歌德%週宏博%劉長振%王愛民
양가덕%주굉박%류장진%왕애민
逆转录聚合酶链反应%蛋白质二硫化物还原酶(谷胱甘肽)%克隆与表达%序列分析
逆轉錄聚閤酶鏈反應%蛋白質二硫化物還原酶(穀胱甘肽)%剋隆與錶達%序列分析
역전록취합매련반응%단백질이류화물환원매(곡광감태)%극륭여표체%서렬분석
目的获得PC12细胞谷胱甘肽二硫键氧化还原酶全长cDNA及表达的蛋白质,分析比较该cDNA及外推的蛋白质序列.方法用逆转录PCR(RT-PCR)获得该蛋白cDNA并将其分别克隆和亚克隆于PUC18和PQE31载体,受体细胞为BL21.亲和层析分离重组蛋白,SDS电泳分析表达产物.结果PC12细胞谷胱甘肽二硫键氧化还原酶全长cDNA含324个碱基,编码含107个氨基酸的蛋白质,并与小鼠和人的该序列有高度同源性,获得了具有活性的谷胱甘肽二硫键氧化还原酶.结论构建了PC12细胞谷胱甘肽二硫键氧化还原酶cDNA在大肠杆菌细胞的克隆表达体系;测定了该蛋白cDNA序列并推导出它的氨基酸排列顺序;证明了该蛋白与人和小鼠具有高度同源性.
目的穫得PC12細胞穀胱甘肽二硫鍵氧化還原酶全長cDNA及錶達的蛋白質,分析比較該cDNA及外推的蛋白質序列.方法用逆轉錄PCR(RT-PCR)穫得該蛋白cDNA併將其分彆剋隆和亞剋隆于PUC18和PQE31載體,受體細胞為BL21.親和層析分離重組蛋白,SDS電泳分析錶達產物.結果PC12細胞穀胱甘肽二硫鍵氧化還原酶全長cDNA含324箇堿基,編碼含107箇氨基痠的蛋白質,併與小鼠和人的該序列有高度同源性,穫得瞭具有活性的穀胱甘肽二硫鍵氧化還原酶.結論構建瞭PC12細胞穀胱甘肽二硫鍵氧化還原酶cDNA在大腸桿菌細胞的剋隆錶達體繫;測定瞭該蛋白cDNA序列併推導齣它的氨基痠排列順序;證明瞭該蛋白與人和小鼠具有高度同源性.
목적획득PC12세포곡광감태이류건양화환원매전장cDNA급표체적단백질,분석비교해cDNA급외추적단백질서렬.방법용역전록PCR(RT-PCR)획득해단백cDNA병장기분별극륭화아극륭우PUC18화PQE31재체,수체세포위BL21.친화층석분리중조단백,SDS전영분석표체산물.결과PC12세포곡광감태이류건양화환원매전장cDNA함324개감기,편마함107개안기산적단백질,병여소서화인적해서렬유고도동원성,획득료구유활성적곡광감태이류건양화환원매.결론구건료PC12세포곡광감태이류건양화환원매cDNA재대장간균세포적극륭표체체계;측정료해단백cDNA서렬병추도출타적안기산배렬순서;증명료해단백여인화소서구유고도동원성.
