CAJ | 학술논문

建立培养乳鼠心肌细胞的缺氧/复氧(A/R)损伤模型和缺氧预处理(APC)模型, 以细胞存活率、细胞内超氧化物趋化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、培养上清液乳酸脱氢酶(LDH)活性作为反映心肌细胞损伤的指标.采用细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1/2)抑制剂PD98059及丝裂素活化蛋白激酶p38α/β (p38α/β)阻滞剂SB203580干预模型, 并以胶内原位磷酸化法测定ERK1/2和p38 活性, 借以探讨ERK1/2和p38α/β在缺氧预处理保护机制中的作用.结果表明: (1)在APC组, 于预处理的缺氧时相给予PD98059, 可以完全消除APC的延迟保护作用; 在A/R组的缺氧时相加入PD98059对细胞损伤无影响; (2)在APC组的预处理缺氧时相给予p38α/β抑制剂SB203580并不能消除APC的保护作用, 而在A/R组的持续缺氧时相给予SB203580则可显著减轻缺氧对细胞的损伤; (3) ERK1/2和p38总活性测定表明, 缺氧可激活ERK1/2和p38, 它们的活性在缺氧后4 h时达到高峰, 而经过APC处理后, 两者活性高峰提前于缺氧后3 h时出现, 且峰值显著降低.上述结果提示, 预处理过程中ERK1/2的激活可能是缺氧预处理延迟保护机制中细胞信号传递的重要环节, 预处理阶段p38α/β的活化不参与APC诱导的延迟保护信号传递过程, p38 的过度激活可能是缺氧/复氧损伤过程中的一个致损伤参与因素, 而预处理抑制随后持续缺氧阶段p38的过度激活可能是其保护机制的一个环节.
건립배양유서심기세포적결양/복양(A/R)손상모형화결양예처리(APC)모형, 이세포존활솔、세포내초양화물추화매(SOD)활성、병이철(MDA)함량、배양상청액유산탈경매(LDH)활성작위반영심기세포손상적지표.채용세포외신호조절단백격매(ERK1/2)억제제PD98059급사렬소활화단백격매p38α/β (p38α/β)조체제SB203580간예모형, 병이효내원위린산화법측정ERK1/2화p38 활성, 차이탐토ERK1/2화p38α/β재결양예처리보호궤제중적작용.결과표명: (1)재APC조, 우예처리적결양시상급여PD98059, 가이완전소제APC적연지보호작용; 재A/R조적결양시상가입PD98059대세포손상무영향; (2)재APC조적예처리결양시상급여p38α/β억제제SB203580병불능소제APC적보호작용, 이재A/R조적지속결양시상급여SB203580칙가현저감경결양대세포적손상; (3) ERK1/2화p38총활성측정표명, 결양가격활ERK1/2화p38, 타문적활성재결양후4 h시체도고봉, 이경과APC처리후, 량자활성고봉제전우결양후3 h시출현, 차봉치현저강저.상술결과제시, 예처리과정중ERK1/2적격활가능시결양예처리연지보호궤제중세포신호전체적중요배절, 예처리계단p38α/β적활화불삼여APC유도적연지보호신호전체과정, p38 적과도격활가능시결양/복양손상과정중적일개치손상삼여인소, 이예처리억제수후지속결양계단p38적과도격활가능시기보호궤제적일개배절.