中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2005年
1期
154-158
,共5页
熊茂林%宋畅%罗荣城%罗超权%李民友%李秀英%朱振宇
熊茂林%宋暢%囉榮城%囉超權%李民友%李秀英%硃振宇
웅무림%송창%라영성%라초권%리민우%리수영%주진우
糖基磷脂酰肌醇类%基因,B7-1%CHO细胞%真核表达%印迹法,蛋白质
糖基燐脂酰肌醇類%基因,B7-1%CHO細胞%真覈錶達%印跡法,蛋白質
당기린지선기순류%기인,B7-1%CHO세포%진핵표체%인적법,단백질
目的:在仓鼠卵巢细胞CHO细胞中高效表达糖基磷脂酰肌醇GPI-B7-1(B7-1即CD80)融合蛋白,获得大量融合蛋白以研究GPI-B7-1在肿瘤治疗中的应用潜力.方法:构建真核表达载体pc3.1/GPI-B7-1,利用脂质体lipofectamine 2000将其转染CHO细胞,G418加压筛选抗性克隆,流式细胞仪检测细胞膜上GPI-B7-1融合蛋白的表达情况,SDS-PAGE、Western blot分析鉴定其免疫活性.结果:真核表达载体转染CHO细胞经G418筛选后,流式细胞分析证实为GPI锚定蛋白,SDS-PAGE在60 kD左右蛋白表达量明显高于对照组,在Western blot在60kD左右有一条强的棕色条带,说明GPI-B7-1在CHO中得到表达.结论:在CHO细胞中高效表达GPI-B7-1融合蛋白,可获得大量融合蛋白,对进一步研究GPI-B7-1在肿瘤治疗中的应用打下基础.
目的:在倉鼠卵巢細胞CHO細胞中高效錶達糖基燐脂酰肌醇GPI-B7-1(B7-1即CD80)融閤蛋白,穫得大量融閤蛋白以研究GPI-B7-1在腫瘤治療中的應用潛力.方法:構建真覈錶達載體pc3.1/GPI-B7-1,利用脂質體lipofectamine 2000將其轉染CHO細胞,G418加壓篩選抗性剋隆,流式細胞儀檢測細胞膜上GPI-B7-1融閤蛋白的錶達情況,SDS-PAGE、Western blot分析鑒定其免疫活性.結果:真覈錶達載體轉染CHO細胞經G418篩選後,流式細胞分析證實為GPI錨定蛋白,SDS-PAGE在60 kD左右蛋白錶達量明顯高于對照組,在Western blot在60kD左右有一條彊的棕色條帶,說明GPI-B7-1在CHO中得到錶達.結論:在CHO細胞中高效錶達GPI-B7-1融閤蛋白,可穫得大量融閤蛋白,對進一步研究GPI-B7-1在腫瘤治療中的應用打下基礎.
목적:재창서란소세포CHO세포중고효표체당기린지선기순GPI-B7-1(B7-1즉CD80)융합단백,획득대량융합단백이연구GPI-B7-1재종류치료중적응용잠력.방법:구건진핵표체재체pc3.1/GPI-B7-1,이용지질체lipofectamine 2000장기전염CHO세포,G418가압사선항성극륭,류식세포의검측세포막상GPI-B7-1융합단백적표체정황,SDS-PAGE、Western blot분석감정기면역활성.결과:진핵표체재체전염CHO세포경G418사선후,류식세포분석증실위GPI묘정단백,SDS-PAGE재60 kD좌우단백표체량명현고우대조조,재Western blot재60kD좌우유일조강적종색조대,설명GPI-B7-1재CHO중득도표체.결론:재CHO세포중고효표체GPI-B7-1융합단백,가획득대량융합단백,대진일보연구GPI-B7-1재종류치료중적응용타하기출.
