中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2007年
11期
1419-1424
,共6页
吴丽贤%许建华%张昆仲%温彩霞%黄秀旺
吳麗賢%許建華%張昆仲%溫綵霞%黃秀旺
오려현%허건화%장곤중%온채하%황수왕
新生霉素%凋亡%热休克90%分子伴侣%HL-60细胞
新生黴素%凋亡%熱休剋90%分子伴侶%HL-60細胞
신생매소%조망%열휴극90%분자반려%HL-60세포
目的 研究Hsp90抑制剂新生霉素(novobiocin,NB)诱导HL-60细胞凋亡的作用,探讨该作用与线粒体凋亡途径的关系,并进一步研究NB对Hsp90客户蛋白(client protein)AKT和ERK2功能的影响.方法 细胞用NB处理后,采用AO/EB染色后荧光显微镜观察凋亡形态,采用Annexin VFITC/PI双染后流式细胞仪检测细胞凋亡率,分光光度法检测Caspase-9和Caspase-3的活性,用蛋白免疫印迹法检测细胞色素C的含量,以及procaspase-3、p-AKT(Ser473)和pERK2的蛋白水平.结果 NB能明显抑制HL-60细胞增殖,IC50是0.3546 mmol·L-1;NB能促进细胞色素C释放入胞质,激活Caspase-3/9的活性,触发HL-60细胞凋亡;NB能抑制AKT和ERK的功能,使细胞内P-AKT(Ser473)和pERK2的蛋白含量减少.结论 NB可通过线粒体途径诱导HL-60细胞凋亡,还可干扰Hsp90伴侣功能阻断增殖信号通路,抑制HL-60细胞生长.
目的 研究Hsp90抑製劑新生黴素(novobiocin,NB)誘導HL-60細胞凋亡的作用,探討該作用與線粒體凋亡途徑的關繫,併進一步研究NB對Hsp90客戶蛋白(client protein)AKT和ERK2功能的影響.方法 細胞用NB處理後,採用AO/EB染色後熒光顯微鏡觀察凋亡形態,採用Annexin VFITC/PI雙染後流式細胞儀檢測細胞凋亡率,分光光度法檢測Caspase-9和Caspase-3的活性,用蛋白免疫印跡法檢測細胞色素C的含量,以及procaspase-3、p-AKT(Ser473)和pERK2的蛋白水平.結果 NB能明顯抑製HL-60細胞增殖,IC50是0.3546 mmol·L-1;NB能促進細胞色素C釋放入胞質,激活Caspase-3/9的活性,觸髮HL-60細胞凋亡;NB能抑製AKT和ERK的功能,使細胞內P-AKT(Ser473)和pERK2的蛋白含量減少.結論 NB可通過線粒體途徑誘導HL-60細胞凋亡,還可榦擾Hsp90伴侶功能阻斷增殖信號通路,抑製HL-60細胞生長.
목적 연구Hsp90억제제신생매소(novobiocin,NB)유도HL-60세포조망적작용,탐토해작용여선립체조망도경적관계,병진일보연구NB대Hsp90객호단백(client protein)AKT화ERK2공능적영향.방법 세포용NB처리후,채용AO/EB염색후형광현미경관찰조망형태,채용Annexin VFITC/PI쌍염후류식세포의검측세포조망솔,분광광도법검측Caspase-9화Caspase-3적활성,용단백면역인적법검측세포색소C적함량,이급procaspase-3、p-AKT(Ser473)화pERK2적단백수평.결과 NB능명현억제HL-60세포증식,IC50시0.3546 mmol·L-1;NB능촉진세포색소C석방입포질,격활Caspase-3/9적활성,촉발HL-60세포조망;NB능억제AKT화ERK적공능,사세포내P-AKT(Ser473)화pERK2적단백함량감소.결론 NB가통과선립체도경유도HL-60세포조망,환가간우Hsp90반려공능조단증식신호통로,억제HL-60세포생장.
