CAJ | 학술논문

目的:在大肠杆菌和毕赤酵母中表达人热激因子(hHSF)-1突变体hHSF190/2,并对其活性进行研究.方法:利用分子克隆技术分别构建了hHSF190/2的原核表达质粒pET45b-hHSF190/2和真核表达质粒pHCZaA-hHSF190/2,分别转入大肠杆菌BL21(DE3)pLysS和毕赤酵母GS115进行诱导表达;经纯化除去杂蛋白后,采用蛋白免疫印迹、电泳迁移率变动分析和蛋白转导等方法研究表达产物的功能和活性.结果:hHSF190/2在2个系统中均得到有效表达,都具有与热激元件(HSE)结合的活性,但真核表达产物与HSE的结合能力明显高于原核表达产物;原核及真核系统表达的hHSF190/2都能激发热激蛋白(HSP)70的表达,但真核表达的hHSF190/2活性更高.结论:hHSF190/2有望成为有治疗作用的蛋白药物.
목적:재대장간균화필적효모중표체인열격인자(hHSF)-1돌변체hHSF190/2,병대기활성진행연구.방법:이용분자극륭기술분별구건료hHSF190/2적원핵표체질립pET45b-hHSF190/2화진핵표체질립pHCZaA-hHSF190/2,분별전입대장간균BL21(DE3)pLysS화필적효모GS115진행유도표체;경순화제거잡단백후,채용단백면역인적、전영천이솔변동분석화단백전도등방법연구표체산물적공능화활성.결과:hHSF190/2재2개계통중균득도유효표체,도구유여열격원건(HSE)결합적활성,단진핵표체산물여HSE적결합능력명현고우원핵표체산물;원핵급진핵계통표체적hHSF190/2도능격발열격단백(HSP)70적표체,단진핵표체적hHSF190/2활성경고.결론:hHSF190/2유망성위유치료작용적단백약물.