潍坊医学院学报
濰坊醫學院學報
유방의학원학보
JOURNAL OF WEIFANG MEDICAL COLLEGE
2009年
6期
401-404
,共4页
Amelotin%pGL3-Basic荧光素酶报告基因载体%成釉细胞
Amelotin%pGL3-Basic熒光素酶報告基因載體%成釉細胞
Amelotin%pGL3-Basic형광소매보고기인재체%성유세포
目的 构建人牙釉质蛋白(Amelotin,AMTN)基因不同长度的上游启动子荧光素酶报告基因载体,比较不同的启动子片段在成釉细胞及Hela细胞中的活性,为进一步判定上游启动子的转录调控区奠定基础.方法 以PCR方法获取基因上游启动子片段,将其构建至报告基因载体pGL3-Basic中,瞬时转染成釉细胞及Hela细胞,通过检测荧光素酶活性来分析启动子区域的转录调控能力.结果 成功地获得了不同长度的Amelotin基因启动子目的片段,酶切鉴定表明不同长度启动子荧光素酶报告基因载体构建成功,不同长度的启动子在不同的细胞中活性不同,-190~-358与-35~-93区域为特异的转录调控作用区.结论 成功构建了不同长度的Amelotin基因启动子的pGL3-Basic荧光素酶报告基因载体,初步确定Amelotin基因启动子的转录活性区,为进一步研究Amelotin基因转录调控特点奠定基础.
目的 構建人牙釉質蛋白(Amelotin,AMTN)基因不同長度的上遊啟動子熒光素酶報告基因載體,比較不同的啟動子片段在成釉細胞及Hela細胞中的活性,為進一步判定上遊啟動子的轉錄調控區奠定基礎.方法 以PCR方法穫取基因上遊啟動子片段,將其構建至報告基因載體pGL3-Basic中,瞬時轉染成釉細胞及Hela細胞,通過檢測熒光素酶活性來分析啟動子區域的轉錄調控能力.結果 成功地穫得瞭不同長度的Amelotin基因啟動子目的片段,酶切鑒定錶明不同長度啟動子熒光素酶報告基因載體構建成功,不同長度的啟動子在不同的細胞中活性不同,-190~-358與-35~-93區域為特異的轉錄調控作用區.結論 成功構建瞭不同長度的Amelotin基因啟動子的pGL3-Basic熒光素酶報告基因載體,初步確定Amelotin基因啟動子的轉錄活性區,為進一步研究Amelotin基因轉錄調控特點奠定基礎.
목적 구건인아유질단백(Amelotin,AMTN)기인불동장도적상유계동자형광소매보고기인재체,비교불동적계동자편단재성유세포급Hela세포중적활성,위진일보판정상유계동자적전록조공구전정기출.방법 이PCR방법획취기인상유계동자편단,장기구건지보고기인재체pGL3-Basic중,순시전염성유세포급Hela세포,통과검측형광소매활성래분석계동자구역적전록조공능력.결과 성공지획득료불동장도적Amelotin기인계동자목적편단,매절감정표명불동장도계동자형광소매보고기인재체구건성공,불동장도적계동자재불동적세포중활성불동,-190~-358여-35~-93구역위특이적전록조공작용구.결론 성공구건료불동장도적Amelotin기인계동자적pGL3-Basic형광소매보고기인재체,초보학정Amelotin기인계동자적전록활성구,위진일보연구Amelotin기인전록조공특점전정기출.