中国血吸虫病防治杂志
中國血吸蟲病防治雜誌
중국혈흡충병방치잡지
CHINESE JOURNAL OF SCHISTOSOMIASIS CONTROL
2010年
6期
552-556,后插1
,共6页
罗超%明珍平%钟沁萍%叶青%蒋明森%董惠芬
囉超%明珍平%鐘沁萍%葉青%蔣明森%董惠芬
라초%명진평%종심평%협청%장명삼%동혜분
日本血吸虫%条件培养基%童虫细胞%乳酸脱氧酶%核仁组织区相关嗜银蛋白
日本血吸蟲%條件培養基%童蟲細胞%乳痠脫氧酶%覈仁組織區相關嗜銀蛋白
일본혈흡충%조건배양기%동충세포%유산탈양매%핵인조직구상관기은단백
目的 以乳酸脱氧酶(LDH)及核仁组织区相关嗜银蛋白(AgNORs)为评价指标,观察条件培养基对日本血吸虫童虫培养细胞的影响.方法 灌注法获取21 d虫龄的日本血吸虫虫体,冷消化法制备细胞悬液,调细胞为1×106个/ml,联合法接种细胞.将接种于小盖玻片上的血吸虫细胞随机分为对照(0 h)组和24、48、72 h 3个实验组共4组.对照组用常规培养基即RPMI-1640含20%小牛血清附加常量抗生素(青霉素1×105U/L,链霉素100 mg/L)培养,实验组培养基为常规培养基分别与培养24、48、72 h的鼻咽癌细胞上清液的条件培养基1:1的混合液.培养第7天,对培养细胞进行LDH及AgNORs染色;每组随机选取300个LDH染色细胞、50个AgNORs染色细胞输入HPIAS-2000图像分析仪测定培养细胞的吸光度(A)值,并作统计分析.结果 日本血吸虫童虫细胞在不同条件培养基作用下,其LDH及AgNORs着色均比对照组深,其中72 h组细胞着色最深,其次是48 h组,再是24 h组,对照组细胞着色最浅.条件培养基培养的各组细胞,LDH含量及AgNORs A值显著大于对照组细胞(q24=8.528 7,q48=15.425 3,q72=27.620 7,P均<0.01;q24=13.569 0,q48=18.728 8,q72=27.035 6,P均<0.01).72 h的条件培养基作用日本血吸虫童虫细胞后,培养细胞的LDH含量及AgNORs A值明显较对照组高(q0/72=27.620 7,P<0.01;q0/72=27.035 6,P<0.01),亦高于其他组(q24/72=19.0919,q48/72=11.842 6,P均<0.01;q24/72=13.569 0,q48/72=18.728 8,P均<0.01).结论 条件培养基可明显增强日本血吸虫童虫培养细胞LDH的活性及增加AgNORs的含量,且72 h的条件培养基对童虫培养细胞的影响最大.
目的 以乳痠脫氧酶(LDH)及覈仁組織區相關嗜銀蛋白(AgNORs)為評價指標,觀察條件培養基對日本血吸蟲童蟲培養細胞的影響.方法 灌註法穫取21 d蟲齡的日本血吸蟲蟲體,冷消化法製備細胞懸液,調細胞為1×106箇/ml,聯閤法接種細胞.將接種于小蓋玻片上的血吸蟲細胞隨機分為對照(0 h)組和24、48、72 h 3箇實驗組共4組.對照組用常規培養基即RPMI-1640含20%小牛血清附加常量抗生素(青黴素1×105U/L,鏈黴素100 mg/L)培養,實驗組培養基為常規培養基分彆與培養24、48、72 h的鼻嚥癌細胞上清液的條件培養基1:1的混閤液.培養第7天,對培養細胞進行LDH及AgNORs染色;每組隨機選取300箇LDH染色細胞、50箇AgNORs染色細胞輸入HPIAS-2000圖像分析儀測定培養細胞的吸光度(A)值,併作統計分析.結果 日本血吸蟲童蟲細胞在不同條件培養基作用下,其LDH及AgNORs著色均比對照組深,其中72 h組細胞著色最深,其次是48 h組,再是24 h組,對照組細胞著色最淺.條件培養基培養的各組細胞,LDH含量及AgNORs A值顯著大于對照組細胞(q24=8.528 7,q48=15.425 3,q72=27.620 7,P均<0.01;q24=13.569 0,q48=18.728 8,q72=27.035 6,P均<0.01).72 h的條件培養基作用日本血吸蟲童蟲細胞後,培養細胞的LDH含量及AgNORs A值明顯較對照組高(q0/72=27.620 7,P<0.01;q0/72=27.035 6,P<0.01),亦高于其他組(q24/72=19.0919,q48/72=11.842 6,P均<0.01;q24/72=13.569 0,q48/72=18.728 8,P均<0.01).結論 條件培養基可明顯增彊日本血吸蟲童蟲培養細胞LDH的活性及增加AgNORs的含量,且72 h的條件培養基對童蟲培養細胞的影響最大.
목적 이유산탈양매(LDH)급핵인조직구상관기은단백(AgNORs)위평개지표,관찰조건배양기대일본혈흡충동충배양세포적영향.방법 관주법획취21 d충령적일본혈흡충충체,랭소화법제비세포현액,조세포위1×106개/ml,연합법접충세포.장접충우소개파편상적혈흡충세포수궤분위대조(0 h)조화24、48、72 h 3개실험조공4조.대조조용상규배양기즉RPMI-1640함20%소우혈청부가상량항생소(청매소1×105U/L,련매소100 mg/L)배양,실험조배양기위상규배양기분별여배양24、48、72 h적비인암세포상청액적조건배양기1:1적혼합액.배양제7천,대배양세포진행LDH급AgNORs염색;매조수궤선취300개LDH염색세포、50개AgNORs염색세포수입HPIAS-2000도상분석의측정배양세포적흡광도(A)치,병작통계분석.결과 일본혈흡충동충세포재불동조건배양기작용하,기LDH급AgNORs착색균비대조조심,기중72 h조세포착색최심,기차시48 h조,재시24 h조,대조조세포착색최천.조건배양기배양적각조세포,LDH함량급AgNORs A치현저대우대조조세포(q24=8.528 7,q48=15.425 3,q72=27.620 7,P균<0.01;q24=13.569 0,q48=18.728 8,q72=27.035 6,P균<0.01).72 h적조건배양기작용일본혈흡충동충세포후,배양세포적LDH함량급AgNORs A치명현교대조조고(q0/72=27.620 7,P<0.01;q0/72=27.035 6,P<0.01),역고우기타조(q24/72=19.0919,q48/72=11.842 6,P균<0.01;q24/72=13.569 0,q48/72=18.728 8,P균<0.01).결론 조건배양기가명현증강일본혈흡충동충배양세포LDH적활성급증가AgNORs적함량,차72 h적조건배양기대동충배양세포적영향최대.
