林业科学
林業科學
임업과학
SCIENTIA SILVAE SINICAE
2012年
3期
31-37
,共7页
马春雷%姚明哲%王新超%金基强%陈亮
馬春雷%姚明哲%王新超%金基彊%陳亮
마춘뢰%요명철%왕신초%금기강%진량
茶树%MYB转录因子%基因克隆%表达分析
茶樹%MYB轉錄因子%基因剋隆%錶達分析
다수%MYB전록인자%기인극륭%표체분석
MYB类转录因子是一类包含一段保守的DNA结合结构域的基因家族,广泛地参与植物发育和植物次生代谢的调节.根据前期芯片杂交和文库筛选得到的2个MYB转录因子的部分序列,采用RT-PCR和RACE技术分离得到它们的全长基因:C3MYBI和C3MYB2,在GenBank的登录号分别为HQ660373和HQ660374.序列分析表明:CsMYBI基因全长1132bp,开放阅读框长879bp,编码292个氨基酸,推测的蛋白分子量约为32.9ku,理论等电点为8.13:CsMYB2基因全长1020bp,其中开放阅读框长675bp,编码224个氨基酸,推测的蛋白分子量约为25.4ku,理论等电点为9.05.2个基因编码的蛋白均具有明显的R2R3M YB结构域,且在R3结构域的下游都含有1个相对保守的C1(LIXXGIDPXTHR)基序.同源性分析表明:茶树CsM YBI和CsMYB2编码的氨基酸序列与其他植物的MYB类转录因子具有较高的相似性,其中CsMYBI编码的氨基酸序列与陆地棉MYBI的相似性为57%,CsMYB2编码的氨基酸序列与葡萄MYBC2的相似性为75%.利用荧光定量PCR技术检测2个转录因子基因在遮荫处理条件下的表达规律,及其在茶树不同组织中的表达特性,结果表明:CsMYBI和CsM YB2在不同组织中均有表达,但表达量具有明显区别,其中CsM YB2在叶片中的相对表达量是根中的100多倍;而遮荫处理能明显降低叶片中的花青素含量,并提高CsMYBI的表达,但对转录因子CsMYB2的影响不大.
MYB類轉錄因子是一類包含一段保守的DNA結閤結構域的基因傢族,廣汎地參與植物髮育和植物次生代謝的調節.根據前期芯片雜交和文庫篩選得到的2箇MYB轉錄因子的部分序列,採用RT-PCR和RACE技術分離得到它們的全長基因:C3MYBI和C3MYB2,在GenBank的登錄號分彆為HQ660373和HQ660374.序列分析錶明:CsMYBI基因全長1132bp,開放閱讀框長879bp,編碼292箇氨基痠,推測的蛋白分子量約為32.9ku,理論等電點為8.13:CsMYB2基因全長1020bp,其中開放閱讀框長675bp,編碼224箇氨基痠,推測的蛋白分子量約為25.4ku,理論等電點為9.05.2箇基因編碼的蛋白均具有明顯的R2R3M YB結構域,且在R3結構域的下遊都含有1箇相對保守的C1(LIXXGIDPXTHR)基序.同源性分析錶明:茶樹CsM YBI和CsMYB2編碼的氨基痠序列與其他植物的MYB類轉錄因子具有較高的相似性,其中CsMYBI編碼的氨基痠序列與陸地棉MYBI的相似性為57%,CsMYB2編碼的氨基痠序列與葡萄MYBC2的相似性為75%.利用熒光定量PCR技術檢測2箇轉錄因子基因在遮蔭處理條件下的錶達規律,及其在茶樹不同組織中的錶達特性,結果錶明:CsMYBI和CsM YB2在不同組織中均有錶達,但錶達量具有明顯區彆,其中CsM YB2在葉片中的相對錶達量是根中的100多倍;而遮蔭處理能明顯降低葉片中的花青素含量,併提高CsMYBI的錶達,但對轉錄因子CsMYB2的影響不大.
MYB류전록인자시일류포함일단보수적DNA결합결구역적기인가족,엄범지삼여식물발육화식물차생대사적조절.근거전기심편잡교화문고사선득도적2개MYB전록인자적부분서렬,채용RT-PCR화RACE기술분리득도타문적전장기인:C3MYBI화C3MYB2,재GenBank적등록호분별위HQ660373화HQ660374.서렬분석표명:CsMYBI기인전장1132bp,개방열독광장879bp,편마292개안기산,추측적단백분자량약위32.9ku,이론등전점위8.13:CsMYB2기인전장1020bp,기중개방열독광장675bp,편마224개안기산,추측적단백분자량약위25.4ku,이론등전점위9.05.2개기인편마적단백균구유명현적R2R3M YB결구역,차재R3결구역적하유도함유1개상대보수적C1(LIXXGIDPXTHR)기서.동원성분석표명:다수CsM YBI화CsMYB2편마적안기산서렬여기타식물적MYB류전록인자구유교고적상사성,기중CsMYBI편마적안기산서렬여륙지면MYBI적상사성위57%,CsMYB2편마적안기산서렬여포도MYBC2적상사성위75%.이용형광정량PCR기술검측2개전록인자기인재차음처리조건하적표체규률,급기재다수불동조직중적표체특성,결과표명:CsMYBI화CsM YB2재불동조직중균유표체,단표체량구유명현구별,기중CsM YB2재협편중적상대표체량시근중적100다배;이차음처리능명현강저협편중적화청소함량,병제고CsMYBI적표체,단대전록인자CsMYB2적영향불대.