水产科学
水產科學
수산과학
FISHERIES SCIENCE
2012年
8期
485-489
,共5页
杨晓飞%徐绍刚%张春香%王跃智%杨贵强
楊曉飛%徐紹剛%張春香%王躍智%楊貴彊
양효비%서소강%장춘향%왕약지%양귀강
核糖体蛋白L34基因%多鳞铲颌鱼%克隆%基因表达
覈糖體蛋白L34基因%多鱗鏟頜魚%剋隆%基因錶達
핵당체단백L34기인%다린산합어%극륭%기인표체
采用同源克隆和cDNA末端快速扩增技术,从多鳞铲颌鱼雄生殖腺中首次克隆得到核糖体蛋白L34 3'末端cDNA序列.该3'末端cDNA序列长297 bp,预测开放阅读框为162 bp,编码53个氨基酸的蛋白质,经BLAST比对,该cDNA序列与斑马鱼、斑点叉尾(鲴)、非洲爪蟾、大西洋鲑同源率达到82%~85%.利用实时定量RT-PCR检测核糖体蛋白L34 mRNA在多鳞铲颌鱼组织中的表达,以及注射激素后在生殖腺中的表达.研究结果表明,核糖体蛋白L34基因在多鳞铲颌鱼雄生殖腺中特异性表达;核糖体蛋白L34在雌性生殖腺、心、脑、鳃、肠和肌肉中表达量较少,其中在雌性生殖腺表达量最低,雄性生殖腺表达量高于雌性生殖腺、肝、心、脑、鳃、肠、肌肉、脾,差异极显著(P<0.01).在雄性生殖腺注射甲基睾丸酮后,核糖体蛋白L34基因的表达量对照组高于注射组,差异显著(P<0.05),在雌性生殖腺注射雌二醇后,核糖体蛋白L34基因表达量对照组高于注射组,差异极显著(P<0.01).
採用同源剋隆和cDNA末耑快速擴增技術,從多鱗鏟頜魚雄生殖腺中首次剋隆得到覈糖體蛋白L34 3'末耑cDNA序列.該3'末耑cDNA序列長297 bp,預測開放閱讀框為162 bp,編碼53箇氨基痠的蛋白質,經BLAST比對,該cDNA序列與斑馬魚、斑點扠尾(鲴)、非洲爪蟾、大西洋鮭同源率達到82%~85%.利用實時定量RT-PCR檢測覈糖體蛋白L34 mRNA在多鱗鏟頜魚組織中的錶達,以及註射激素後在生殖腺中的錶達.研究結果錶明,覈糖體蛋白L34基因在多鱗鏟頜魚雄生殖腺中特異性錶達;覈糖體蛋白L34在雌性生殖腺、心、腦、鰓、腸和肌肉中錶達量較少,其中在雌性生殖腺錶達量最低,雄性生殖腺錶達量高于雌性生殖腺、肝、心、腦、鰓、腸、肌肉、脾,差異極顯著(P<0.01).在雄性生殖腺註射甲基睪汍酮後,覈糖體蛋白L34基因的錶達量對照組高于註射組,差異顯著(P<0.05),在雌性生殖腺註射雌二醇後,覈糖體蛋白L34基因錶達量對照組高于註射組,差異極顯著(P<0.01).
채용동원극륭화cDNA말단쾌속확증기술,종다린산합어웅생식선중수차극륭득도핵당체단백L34 3'말단cDNA서렬.해3'말단cDNA서렬장297 bp,예측개방열독광위162 bp,편마53개안기산적단백질,경BLAST비대,해cDNA서렬여반마어、반점차미(고)、비주조섬、대서양해동원솔체도82%~85%.이용실시정량RT-PCR검측핵당체단백L34 mRNA재다린산합어조직중적표체,이급주사격소후재생식선중적표체.연구결과표명,핵당체단백L34기인재다린산합어웅생식선중특이성표체;핵당체단백L34재자성생식선、심、뇌、새、장화기육중표체량교소,기중재자성생식선표체량최저,웅성생식선표체량고우자성생식선、간、심、뇌、새、장、기육、비,차이겁현저(P<0.01).재웅성생식선주사갑기고환동후,핵당체단백L34기인적표체량대조조고우주사조,차이현저(P<0.05),재자성생식선주사자이순후,핵당체단백L34기인표체량대조조고우주사조,차이겁현저(P<0.01).