安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2008年
3期
902-903,905
,共3页
油茶%RAPD分析%最佳反应体系
油茶%RAPD分析%最佳反應體繫
유다%RAPD분석%최가반응체계
[目的]为建立油茶RAPD分析的最佳反应体系.[方法]分别用改良SDS法和CTAB法从12个油茶品种的新鲜幼叶中提取基因组DNA.通过测定OD260和OD280来比较两种方法提取DNA的纯度.建立油茶的RAPD反应程序,通过优化反应条件获得油茶RAPD分析的最佳反应体系.[结果]CTAB法提取的油茶基因组DNA纯度高于SDS法.油茶RAPD分析的最佳反应体系为:1.0 U Taq DNA聚合酶、1.5 mmol/L MgCl2、200 μmol/L dNTP、10 pmol/L随机引物、20 ng DNA模板、2 μl 10×PCR buffer,加重蒸水至20 μl.油茶的RAPD反应程序为:95 ℃预变性3 min;94 ℃变性1 min,40 ℃退火1 min,72 ℃延伸2 min,40循环;72 ℃延伸7 min.[结论]该研究所用DNA纯度较高,反应条件控制严格,试验中扩增稳定性较好,是适合油茶RAPD分析的最佳反应体系.
[目的]為建立油茶RAPD分析的最佳反應體繫.[方法]分彆用改良SDS法和CTAB法從12箇油茶品種的新鮮幼葉中提取基因組DNA.通過測定OD260和OD280來比較兩種方法提取DNA的純度.建立油茶的RAPD反應程序,通過優化反應條件穫得油茶RAPD分析的最佳反應體繫.[結果]CTAB法提取的油茶基因組DNA純度高于SDS法.油茶RAPD分析的最佳反應體繫為:1.0 U Taq DNA聚閤酶、1.5 mmol/L MgCl2、200 μmol/L dNTP、10 pmol/L隨機引物、20 ng DNA模闆、2 μl 10×PCR buffer,加重蒸水至20 μl.油茶的RAPD反應程序為:95 ℃預變性3 min;94 ℃變性1 min,40 ℃退火1 min,72 ℃延伸2 min,40循環;72 ℃延伸7 min.[結論]該研究所用DNA純度較高,反應條件控製嚴格,試驗中擴增穩定性較好,是適閤油茶RAPD分析的最佳反應體繫.
[목적]위건립유다RAPD분석적최가반응체계.[방법]분별용개량SDS법화CTAB법종12개유다품충적신선유협중제취기인조DNA.통과측정OD260화OD280래비교량충방법제취DNA적순도.건립유다적RAPD반응정서,통과우화반응조건획득유다RAPD분석적최가반응체계.[결과]CTAB법제취적유다기인조DNA순도고우SDS법.유다RAPD분석적최가반응체계위:1.0 U Taq DNA취합매、1.5 mmol/L MgCl2、200 μmol/L dNTP、10 pmol/L수궤인물、20 ng DNA모판、2 μl 10×PCR buffer,가중증수지20 μl.유다적RAPD반응정서위:95 ℃예변성3 min;94 ℃변성1 min,40 ℃퇴화1 min,72 ℃연신2 min,40순배;72 ℃연신7 min.[결론]해연구소용DNA순도교고,반응조건공제엄격,시험중확증은정성교호,시괄합유다RAPD분석적최가반응체계.
