CAJ | 학술논문

背景与目的:细胞膜-细胞骨架联接蛋白(埃兹蛋白,Ezrin)参与了许多细胞的功能,包括细胞黏附、细胞运动以及细胞的生存.最近的许多研究表明Ezrin参与调控了肿瘤的侵袭与转移.然而,在骨肉瘤中,Ezrin所扮演的重要角色还没有被很清晰的阐明.本研究拟探讨Ezrin蛋白对人骨肉瘤细胞增殖和侵袭能力的影响.方法:以骨肉瘤MG-63细胞系为研究对象,针对Ezrin编码基因设计小干扰RNA片段,重组其shRNA(short hairpin RNA)表达载体转染入细胞,筛选稳定表达的克隆,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹(Western-Blot)方法检测转染后Ezrin的mRNA和蛋白的表达水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,Transwell法检测侵袭能力的变化.结果:RT-PCR和Western blot检测显示shRNA对Ezrin在基因和蛋白水平均有显著下调作用.骨肉瘤细胞生长速度减慢,处于分裂期的细胞比例有明显的下降,由25.05%下降到18.36%,而G1期细胞比例则由60.57%上升到67.65%.穿过人工基底膜的细胞数量也明显减少,由35.9±5.6减少为22.5±2.8(P＜0.01).结论:Ezrin在骨肉瘤的增殖和侵袭过程中发挥有重要作用,可能成为抑制肿瘤增殖和转移的关键性分子.
배경여목적:세포막-세포골가련접단백(애자단백,Ezrin)삼여료허다세포적공능,포괄세포점부、세포운동이급세포적생존.최근적허다연구표명Ezrin삼여조공료종류적침습여전이.연이,재골육류중,Ezrin소분연적중요각색환몰유피흔청석적천명.본연구의탐토Ezrin단백대인골육류세포증식화침습능력적영향.방법:이골육류MG-63세포계위연구대상,침대Ezrin편마기인설계소간우RNA편단,중조기shRNA(short hairpin RNA)표체재체전염입세포,사선은정표체적극륭,역전록취합매련반응(RT-PCR)화면역인적(Western-Blot)방법검측전염후Ezrin적mRNA화단백적표체수평,사갑기우담서람(MTT)법검측증식능력,류식세포술검측세포주기,Transwell법검측침습능력적변화.결과:RT-PCR화Western blot검측현시shRNA대Ezrin재기인화단백수평균유현저하조작용.골육류세포생장속도감만,처우분렬기적세포비례유명현적하강,유25.05%하강도18.36%,이G1기세포비례칙유60.57%상승도67.65%.천과인공기저막적세포수량야명현감소,유35.9±5.6감소위22.5±2.8(P＜0.01).결론:Ezrin재골육류적증식화침습과정중발휘유중요작용,가능성위억제종류증식화전이적관건성분자.