内蒙古大学学报（自然科学版）
內矇古大學學報（自然科學版）
내몽고대학학보（자연과학판）
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS NEIMONGOL
2008年
5期
548-551,后插2
,共5页
邢万金%赵宇航%任仕超%包晓红
邢萬金%趙宇航%任仕超%包曉紅
형만금%조우항%임사초%포효홍
原核表达%红色荧光蛋白%DSRed2%实验教学
原覈錶達%紅色熒光蛋白%DSRed2%實驗教學
원핵표체%홍색형광단백%DSRed2%실험교학
用PcR方法从质粒pDsRed2-1中扩增获得DsRed2,亚克隆到pMD19-T载体上,然后酶切将DsRed2分别插入到原核表达载体pET-Trx和pGEX-4T1上,转入E.coli BL21(DE3)中,用IPTG诱导表达.在LB平板培养基上或液体培养基中直接观察菌体颜色,最后用SDS-PAGE检测DsRed2蛋白的表达.结果显示构建的重组载体pET-Trx-DsRed2和pGEX-GsT-DsRed2在E.coli中成功表达,且不形成多聚体.LB平板培养基上和IPTG诱导24h后的液体培养基中都能直接观察到红色荧光,说明DsRed2可以作为原核表达系统的报告基因.
用PcR方法從質粒pDsRed2-1中擴增穫得DsRed2,亞剋隆到pMD19-T載體上,然後酶切將DsRed2分彆插入到原覈錶達載體pET-Trx和pGEX-4T1上,轉入E.coli BL21(DE3)中,用IPTG誘導錶達.在LB平闆培養基上或液體培養基中直接觀察菌體顏色,最後用SDS-PAGE檢測DsRed2蛋白的錶達.結果顯示構建的重組載體pET-Trx-DsRed2和pGEX-GsT-DsRed2在E.coli中成功錶達,且不形成多聚體.LB平闆培養基上和IPTG誘導24h後的液體培養基中都能直接觀察到紅色熒光,說明DsRed2可以作為原覈錶達繫統的報告基因.
용PcR방법종질립pDsRed2-1중확증획득DsRed2,아극륭도pMD19-T재체상,연후매절장DsRed2분별삽입도원핵표체재체pET-Trx화pGEX-4T1상,전입E.coli BL21(DE3)중,용IPTG유도표체.재LB평판배양기상혹액체배양기중직접관찰균체안색,최후용SDS-PAGE검측DsRed2단백적표체.결과현시구건적중조재체pET-Trx-DsRed2화pGEX-GsT-DsRed2재E.coli중성공표체,차불형성다취체.LB평판배양기상화IPTG유도24h후적액체배양기중도능직접관찰도홍색형광,설명DsRed2가이작위원핵표체계통적보고기인.
