生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2010年
3期
1-3
,共3页
马艳玲%邓海%刘中来%邓灵福%刘艳丽%祁超
馬豔玲%鄧海%劉中來%鄧靈福%劉豔麗%祁超
마염령%산해%류중래%산령복%류염려%기초
海洋放线菌S.arenicola%基因组文库%噬菌体
海洋放線菌S.arenicola%基因組文庫%噬菌體
해양방선균S.arenicola%기인조문고%서균체
目的:构建稀有海洋放线菌S. arenicola基因组文库.方法:以稀有海洋放线菌S.arenicola为实验材料,随机剪切提取的总DNA,5'- 磷酸末端补平回收40kb左右的DNA片段,与pWEBTM载体连接,经包装蛋白包装成噬菌体后侵染宿主细胞E. coli EPI100,构建该菌株的基因组文库,并对该文库进行质量鉴定.结果:成功构建了稀有海洋放线菌S.arenicola的基因组文库,效价达6.5×104CFU/mL,得到3 000个阳性克隆子,远远大于按覆盖率为99%计算至少所需的657个阳性克隆子数,且平均插入片段长度为36kb,重组率100%.阳性克隆子保存于96孔板中,-80℃保存.结论:所构建文库的各项指标均达到要求,为了进一步评估S.arenicola所能合成的所有潜在天然产物,还需要进一步检测该文库中包含有生物合成基因簇的大肠杆菌的表达情况.
目的:構建稀有海洋放線菌S. arenicola基因組文庫.方法:以稀有海洋放線菌S.arenicola為實驗材料,隨機剪切提取的總DNA,5'- 燐痠末耑補平迴收40kb左右的DNA片段,與pWEBTM載體連接,經包裝蛋白包裝成噬菌體後侵染宿主細胞E. coli EPI100,構建該菌株的基因組文庫,併對該文庫進行質量鑒定.結果:成功構建瞭稀有海洋放線菌S.arenicola的基因組文庫,效價達6.5×104CFU/mL,得到3 000箇暘性剋隆子,遠遠大于按覆蓋率為99%計算至少所需的657箇暘性剋隆子數,且平均插入片段長度為36kb,重組率100%.暘性剋隆子保存于96孔闆中,-80℃保存.結論:所構建文庫的各項指標均達到要求,為瞭進一步評估S.arenicola所能閤成的所有潛在天然產物,還需要進一步檢測該文庫中包含有生物閤成基因簇的大腸桿菌的錶達情況.
목적:구건희유해양방선균S. arenicola기인조문고.방법:이희유해양방선균S.arenicola위실험재료,수궤전절제취적총DNA,5'- 린산말단보평회수40kb좌우적DNA편단,여pWEBTM재체련접,경포장단백포장성서균체후침염숙주세포E. coli EPI100,구건해균주적기인조문고,병대해문고진행질량감정.결과:성공구건료희유해양방선균S.arenicola적기인조문고,효개체6.5×104CFU/mL,득도3 000개양성극륭자,원원대우안복개솔위99%계산지소소수적657개양성극륭자수,차평균삽입편단장도위36kb,중조솔100%.양성극륭자보존우96공판중,-80℃보존.결론:소구건문고적각항지표균체도요구,위료진일보평고S.arenicola소능합성적소유잠재천연산물,환수요진일보검측해문고중포함유생물합성기인족적대장간균적표체정황.
