上海交通大学学报(医学版)
上海交通大學學報(醫學版)
상해교통대학학보(의학판)
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2010年
9期
1084-1089
,共6页
黄金刚%童海骏%刘宏强%张晓玲
黃金剛%童海駿%劉宏彊%張曉玲
황금강%동해준%류굉강%장효령
骨关节炎%基质金属蛋白酶%蛋白聚糖酶%白介素-1β%肿瘤坏死因子-α
骨關節炎%基質金屬蛋白酶%蛋白聚糖酶%白介素-1β%腫瘤壞死因子-α
골관절염%기질금속단백매%단백취당매%백개소-1β%종류배사인자-α
目的 研究白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对关节软骨细胞外基质降解的作用及相关分子机制.方法 体外培养大鼠原代关节软骨细胞,单独或联合使用IL-1β和(或)TNF-α刺激软骨细胞,分别设为IL-1β刺激组、TNF-α刺激组、IL-1β和TNF-α联合刺激组;另设无任何刺激的对照组.在细胞培养24、48、72 h时点,采用倒置显微镜观察软骨细胞外基质的变化;采用Real-Time PCR法检测基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、蛋白聚糖降解酶-1(Adamts- 4)和蛋白聚糖降解酶-2(Adamts-5) mRNA的表达.结果 细胞在培养48、72 h时点,显微镜观察显示对照组与TNF-α刺激组的软骨细胞外基质降解情况无明显差异;IL-1β刺激组、IL-1β和TNF-α联合刺激组细胞外基质失染、降解,细胞形态缩小,细胞间隙增宽.与对照组比较,细胞培养24 h时点,IL-1β刺激组MMP-13、Adamts- 4和Adamts-5 mRNA的表达显著上调(P<0.01);而在培养48、72 h时点有所下调.IL-1β和TNF-α联合刺激组与IL-1β刺激组比较,在培养各时点,MMP-13、Adamts- 4和Adamts-5 mRNA表达差异均无统计学意义(P>0.05).结论 IL-1β诱导软骨细胞产生大量的MMP-13、Adamts- 4和Adamts-5而直接降解软骨细胞外基质;TNF-α可能不直接引起软骨细胞外基质的降解.
目的 研究白介素-1β(IL-1β)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)對關節軟骨細胞外基質降解的作用及相關分子機製.方法 體外培養大鼠原代關節軟骨細胞,單獨或聯閤使用IL-1β和(或)TNF-α刺激軟骨細胞,分彆設為IL-1β刺激組、TNF-α刺激組、IL-1β和TNF-α聯閤刺激組;另設無任何刺激的對照組.在細胞培養24、48、72 h時點,採用倒置顯微鏡觀察軟骨細胞外基質的變化;採用Real-Time PCR法檢測基質金屬蛋白酶-13(MMP-13)、蛋白聚糖降解酶-1(Adamts- 4)和蛋白聚糖降解酶-2(Adamts-5) mRNA的錶達.結果 細胞在培養48、72 h時點,顯微鏡觀察顯示對照組與TNF-α刺激組的軟骨細胞外基質降解情況無明顯差異;IL-1β刺激組、IL-1β和TNF-α聯閤刺激組細胞外基質失染、降解,細胞形態縮小,細胞間隙增寬.與對照組比較,細胞培養24 h時點,IL-1β刺激組MMP-13、Adamts- 4和Adamts-5 mRNA的錶達顯著上調(P<0.01);而在培養48、72 h時點有所下調.IL-1β和TNF-α聯閤刺激組與IL-1β刺激組比較,在培養各時點,MMP-13、Adamts- 4和Adamts-5 mRNA錶達差異均無統計學意義(P>0.05).結論 IL-1β誘導軟骨細胞產生大量的MMP-13、Adamts- 4和Adamts-5而直接降解軟骨細胞外基質;TNF-α可能不直接引起軟骨細胞外基質的降解.
목적 연구백개소-1β(IL-1β)화종류배사인자-α(TNF-α)대관절연골세포외기질강해적작용급상관분자궤제.방법 체외배양대서원대관절연골세포,단독혹연합사용IL-1β화(혹)TNF-α자격연골세포,분별설위IL-1β자격조、TNF-α자격조、IL-1β화TNF-α연합자격조;령설무임하자격적대조조.재세포배양24、48、72 h시점,채용도치현미경관찰연골세포외기질적변화;채용Real-Time PCR법검측기질금속단백매-13(MMP-13)、단백취당강해매-1(Adamts- 4)화단백취당강해매-2(Adamts-5) mRNA적표체.결과 세포재배양48、72 h시점,현미경관찰현시대조조여TNF-α자격조적연골세포외기질강해정황무명현차이;IL-1β자격조、IL-1β화TNF-α연합자격조세포외기질실염、강해,세포형태축소,세포간극증관.여대조조비교,세포배양24 h시점,IL-1β자격조MMP-13、Adamts- 4화Adamts-5 mRNA적표체현저상조(P<0.01);이재배양48、72 h시점유소하조.IL-1β화TNF-α연합자격조여IL-1β자격조비교,재배양각시점,MMP-13、Adamts- 4화Adamts-5 mRNA표체차이균무통계학의의(P>0.05).결론 IL-1β유도연골세포산생대량적MMP-13、Adamts- 4화Adamts-5이직접강해연골세포외기질;TNF-α가능불직접인기연골세포외기질적강해.
