CAJ | 학술논문

目的探讨Napsin A基因转染至A549细胞对其上皮-间质转化(EMT)的作用和机制.方法采用慢病毒载体质粒PLJM1构建重组质粒PLJM1-Napsin A,将Napsin A基因转染至A549细胞染色体中并鉴定.用转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激A549细胞构建体外EMT模型,倒置显微镜下动态观察细胞形态学的变化,观察Napsin A基因转染对A549细胞在体外EMT模型中细胞EMT和表达黏着斑激酶(FAK)的影响.结果重组质粒PLJM1-Napsin A测序结果与设计序列完全符合,转Napsin A基因A549细胞表达Napsin A蛋白显著高于非转基因细胞组(P＜0.01).细胞经TGF-β1刺激后形态上演变为间质细胞,E钙蛋白的mRNA和蛋白表达水平明显下调(P＜0.01),相反Ⅰ型胶原则显著上调(P＜0.01),提示体外构建EMT模型获得成功.转Napsin A基因A549细胞在TGF-β1干预后,其细胞形态间质改变、E钙蛋白和Ⅰ型胶原的表达量也发生相似变化趋势,但变化幅度显著变小(其中E钙蛋白:P＜0.01,Ⅰ型胶原:P＜0.05).体外EMT模型中,细胞FAK蛋白表达量增多(P＜0.01),但转基因细胞上调趋势明显小于未转基因细胞(P＜0.01).结论转染Napsin A基因至A549细胞可以部分阻滞细胞EMT进程,其作用机制可能与抑制整合素信号转导通路有关.
목적 탐토Napsin A기인전염지A549세포대기상피-간질전화(EMT)적작용화궤제.방법 채용만병독재체질립PLJM1구건중조질립PLJM1-Napsin A,장Napsin A기인전염지A549세포염색체중병감정.용전화생장인자-β1(TGF-β1)자격A549세포구건체외EMT모형,도치현미경하동태관찰세포형태학적변화,관찰Napsin A기인전염대A549세포재체외EMT모형중세포EMT화표체점착반격매(FAK)적영향.결과중조질립PLJM1-Napsin A측서결과여설계서렬완전부합,전Napsin A기인A549세포표체Napsin A단백현저고우비전기인세포조(P＜0.01).세포경TGF-β1자격후형태상연변위간질세포,E개단백적mRNA화단백표체수평명현하조(P＜0.01),상반Ⅰ형효원칙현저상조(P＜0.01),제시체외구건EMT모형획득성공.전Napsin A기인A549세포재TGF-β1간예후,기세포형태간질개변、E개단백화Ⅰ형효원적표체량야발생상사변화추세,단변화폭도현저변소(기중E개단백:P＜0.01,Ⅰ형효원:P＜0.05).체외EMT모형중,세포FAK단백표체량증다(P＜0.01),단전기인세포상조추세명현소우미전기인세포(P＜0.01).결론전염Napsin A기인지A549세포가이부분조체세포EMT진정,기작용궤제가능여억제정합소신호전도통로유관.