CAJ | 학술논문

背景:近年来阳离子脂质体成为基因转移较为常用的载体,但应用脂质体对mIMCD-3细胞株进行转染的相关报道较少.目的:探讨脂质体法转染mIMCD-3细胞株的可行性,并通过优化脂质体转染效率的影响因素,获得mIMCD-3的最佳转染条件.方法:以绿色荧光蛋白作为报告基因,采用脂质体LipofectamineTM 2000包裹pIRES2-EGFP质粒转染mIMCD-3细胞,分别按照细胞接种密度、DNA用量、DNA与脂质体的比例、不同的质粒抽提方法、血清有无设定分组,观察以上因素对mIMCD-3细胞转染效率的影响.结果与结论:采用脂质体LipofectamineTM 2000转染mIMCD-3细胞,在2×108 L-1细胞接种浓度、1 μg DNA用量、1∶3的DNA与脂质体比例时,转染效率最高.采用美国OMEGA公司生产的E.Z.N.A.Endo-Free Plasmid Mini Kit抽提的质粒能获得更高的转染效率.转染前漂洗细胞后换入无血清培养基比有血清组转染效率高(P < 0.01),而转染后6 h加入血清不影响转染效率.结果显示,脂质体法转染mIMCD-3细胞株是可行的,通过优化脂质体转染效率的影响因素,获得了mIMCD-3的最佳转染条件,可作为有关研究或应用的参考.
배경:근년래양리자지질체성위기인전이교위상용적재체,단응용지질체대mIMCD-3세포주진행전염적상관보도교소.목적:탐토지질체법전염mIMCD-3세포주적가행성,병통과우화지질체전염효솔적영향인소,획득mIMCD-3적최가전염조건.방법:이록색형광단백작위보고기인,채용지질체LipofectamineTM 2000포과pIRES2-EGFP질립전염mIMCD-3세포,분별안조세포접충밀도、DNA용량、DNA여지질체적비례、불동적질립추제방법、혈청유무설정분조,관찰이상인소대mIMCD-3세포전염효솔적영향.결과여결론:채용지질체LipofectamineTM 2000전염mIMCD-3세포,재2×108 L-1세포접충농도、1 μg DNA용량、1∶3적DNA여지질체비례시,전염효솔최고.채용미국OMEGA공사생산적E.Z.N.A.Endo-Free Plasmid Mini Kit추제적질립능획득경고적전염효솔.전염전표세세포후환입무혈청배양기비유혈청조전염효솔고(P < 0.01),이전염후6 h가입혈청불영향전염효솔.결과현시,지질체법전염mIMCD-3세포주시가행적,통과우화지질체전염효솔적영향인소,획득료mIMCD-3적최가전염조건,가작위유관연구혹응용적삼고.