华中农业大学学报
華中農業大學學報
화중농업대학학보
JOURNAL OF HUAZHONG AGRICULTURAL UNIVERSITY
2012年
3期
325-331
,共7页
李亚楠%张彦博%胡美英%陈少华%胡振%易欣%林惠花
李亞楠%張彥博%鬍美英%陳少華%鬍振%易訢%林惠花
리아남%장언박%호미영%진소화%호진%역흔%림혜화
甲基对硫磷水解酶%毒死蜱%随机突变%易错PCR%同源建模%分子对接
甲基對硫燐水解酶%毒死蜱%隨機突變%易錯PCR%同源建模%分子對接
갑기대류린수해매%독사비%수궤돌변%역착PCR%동원건모%분자대접
甲基对硫磷水解酶(MPH)能高效降解甲基对硫磷,并能够降解杀螟松、乙基对硫磷和毒死蜱,但降解效率依次降低.为提高MPH对毒死蜱的降解活性,采用易错PCR的方法对MPH进行随机突变,筛选到2株突变体A291V和K173R,并对其进行原核表达,结果表明K173R对毒死蜱的降解活性比MPH提高了41.55％.通过同源建模及与毒死蜱的分子对接对酶的结构和功能进行初步分析,结果发现氨基酸残基R72在酶与毒死蜱的结合中起着重要作用.结合口袋和关键氨基酸的变化可最终导致K173R酶活性的提高.
甲基對硫燐水解酶(MPH)能高效降解甲基對硫燐,併能夠降解殺螟鬆、乙基對硫燐和毒死蜱,但降解效率依次降低.為提高MPH對毒死蜱的降解活性,採用易錯PCR的方法對MPH進行隨機突變,篩選到2株突變體A291V和K173R,併對其進行原覈錶達,結果錶明K173R對毒死蜱的降解活性比MPH提高瞭41.55％.通過同源建模及與毒死蜱的分子對接對酶的結構和功能進行初步分析,結果髮現氨基痠殘基R72在酶與毒死蜱的結閤中起著重要作用.結閤口袋和關鍵氨基痠的變化可最終導緻K173R酶活性的提高.
갑기대류린수해매(MPH)능고효강해갑기대류린,병능구강해살명송、을기대류린화독사비,단강해효솔의차강저.위제고MPH대독사비적강해활성,채용역착PCR적방법대MPH진행수궤돌변,사선도2주돌변체A291V화K173R,병대기진행원핵표체,결과표명K173R대독사비적강해활성비MPH제고료41.55％.통과동원건모급여독사비적분자대접대매적결구화공능진행초보분석,결과발현안기산잔기R72재매여독사비적결합중기착중요작용.결합구대화관건안기산적변화가최종도치K173R매활성적제고.
