中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2003年
4期
537-541
,共5页
马素参%黄海明%彭隽敏%俞强%任瑞宝%高友鹤
馬素參%黃海明%彭雋敏%俞彊%任瑞寶%高友鶴
마소삼%황해명%팽준민%유강%임서보%고우학
结构域蛋白质组学%SH2结构域%结构域克隆库
結構域蛋白質組學%SH2結構域%結構域剋隆庫
결구역단백질조학%SH2결구역%결구역극륭고
对蛋白质组学的研究有许多不同的切入方法.从研究的生物学意义和可行性考虑,提出从蛋白结构域入手进行蛋白质组学研究.SH2(Src homology 2)结构域是细胞信号转导中重要的元件之一,人SH2结构域共有约120种,对其进行研究将深刻揭示细胞信号转导的规律.为了得到人所有的SH2结构域序列及克隆,首先在公共数据库里检索出了人所有的SH2结构域序列,利用国际上现有的共享资源IMAGE(Integrated Molecular Analysis of Genomes and Their Expression)克隆为PCR模板,解决了从cDNA文库中难以克隆低丰度结构域的问题.利用有方向性的TOPO克隆技术提高克隆效率,从而快速高效地构建了包括60个SH2结构域的克隆库.克隆库可以方便地转换到GATEWAY系统具有各种用途的载体上,为SH2结构域的蛋白质组学研究奠定了坚实的基础.
對蛋白質組學的研究有許多不同的切入方法.從研究的生物學意義和可行性攷慮,提齣從蛋白結構域入手進行蛋白質組學研究.SH2(Src homology 2)結構域是細胞信號轉導中重要的元件之一,人SH2結構域共有約120種,對其進行研究將深刻揭示細胞信號轉導的規律.為瞭得到人所有的SH2結構域序列及剋隆,首先在公共數據庫裏檢索齣瞭人所有的SH2結構域序列,利用國際上現有的共享資源IMAGE(Integrated Molecular Analysis of Genomes and Their Expression)剋隆為PCR模闆,解決瞭從cDNA文庫中難以剋隆低豐度結構域的問題.利用有方嚮性的TOPO剋隆技術提高剋隆效率,從而快速高效地構建瞭包括60箇SH2結構域的剋隆庫.剋隆庫可以方便地轉換到GATEWAY繫統具有各種用途的載體上,為SH2結構域的蛋白質組學研究奠定瞭堅實的基礎.
대단백질조학적연구유허다불동적절입방법.종연구적생물학의의화가행성고필,제출종단백결구역입수진행단백질조학연구.SH2(Src homology 2)결구역시세포신호전도중중요적원건지일,인SH2결구역공유약120충,대기진행연구장심각게시세포신호전도적규률.위료득도인소유적SH2결구역서렬급극륭,수선재공공수거고리검색출료인소유적SH2결구역서렬,이용국제상현유적공향자원IMAGE(Integrated Molecular Analysis of Genomes and Their Expression)극륭위PCR모판,해결료종cDNA문고중난이극륭저봉도결구역적문제.이용유방향성적TOPO극륭기술제고극륭효솔,종이쾌속고효지구건료포괄60개SH2결구역적극륭고.극륭고가이방편지전환도GATEWAY계통구유각충용도적재체상,위SH2결구역적단백질조학연구전정료견실적기출.
