CAJ | 학술논문

目的:以杂交瘤技术制备抗肺炎衣原体(Cpn)单克隆抗体,用于衣原体感染的诊断及相关疾病的研究.方法:以进口Cpn抗原免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠的脾脏细胞与SP2/0细胞融合,用间接ELISA法筛选抗体阳性杂交瘤细胞.收集接种过杂交瘤细胞的小鼠腹水,分别用ELISA法检测抗体效价、用免疫琼脂扩散试验鉴定单抗的类别、用微量荧光免疫试验(MIF)检测单抗的种属特异性.用克隆表达的主要外膜蛋白(MOMP)通过Dot-ELISA法分析单抗的特异性.通过建立直接免疫荧光法(DIF)检测病人和正常人外周血单核细胞(PBMC)标本,并进行统计处理.结果:小鼠脾脏细胞与SP2/0细胞的融合率为61.46%(236/384),最终获得4株稳定分泌Cpn单抗的细胞株.用ELISA法检测小鼠腹水,效价高者可达1:100 000.免疫琼脂扩散试验鉴定为IgG类单抗,扩散效价达1:128.自制单抗能与重组MOMP发生结合反应,表明其为抗Cpn MOMP抗体.自制单抗与进口单抗类似,即与鹦鹉热衣原体(Cps)出现一定程度的交叉反应,而与沙眼衣原体(Ct)则无交叉反应.对240份PBMC标本用自制单抗和进口单抗同时检测Cpn抗原,2种单抗检测均阳性的共86份,经SPSS软件分析两者具有较好的一致性.DIF检测显示,心血管疾病和呼吸道疾病Cpn抗原阳性检出率分别为69.34%(95/137)和72.06%(49/68),与正常人标本Cpn抗原阳性率相比,均具有显著性差异.结论:获得IgG类抗Cpn MOMP单抗,自制Cpn单抗的特异性和敏感性均与进口单抗具有较好的一致性.PBMC Cpn抗原检测的统计分析证实,对于动脉粥样硬化等某些疾病的发生和发展,Cpn感染可能是重要的原因之一,但其中的因果关系还有待深入研究.
목적:이잡교류기술제비항폐염의원체(Cpn)단극륭항체,용우의원체감염적진단급상관질병적연구.방법:이진구Cpn항원면역BALB/c소서,장면역소서적비장세포여SP2/0세포융합,용간접ELISA법사선항체양성잡교류세포.수집접충과잡교류세포적소서복수,분별용ELISA법검측항체효개、용면역경지확산시험감정단항적유별、용미량형광면역시험(MIF)검측단항적충속특이성.용극륭표체적주요외막단백(MOMP)통과Dot-ELISA법분석단항적특이성.통과건립직접면역형광법(DIF)검측병인화정상인외주혈단핵세포(PBMC)표본,병진행통계처리.결과:소서비장세포여SP2/0세포적융합솔위61.46%(236/384),최종획득4주은정분비Cpn단항적세포주.용ELISA법검측소서복수,효개고자가체1:100 000.면역경지확산시험감정위IgG류단항,확산효개체1:128.자제단항능여중조MOMP발생결합반응,표명기위항Cpn MOMP항체.자제단항여진구단항유사,즉여앵무열의원체(Cps)출현일정정도적교차반응,이여사안의원체(Ct)칙무교차반응.대240빈PBMC표본용자제단항화진구단항동시검측Cpn항원,2충단항검측균양성적공86빈,경SPSS연건분석량자구유교호적일치성.DIF검측현시,심혈관질병화호흡도질병Cpn항원양성검출솔분별위69.34%(95/137)화72.06%(49/68),여정상인표본Cpn항원양성솔상비,균구유현저성차이.결론:획득IgG류항Cpn MOMP단항,자제Cpn단항적특이성화민감성균여진구단항구유교호적일치성.PBMC Cpn항원검측적통계분석증실,대우동맥죽양경화등모사질병적발생화발전,Cpn감염가능시중요적원인지일,단기중적인과관계환유대심입연구.