重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2009年
10期
1195-1197
,共3页
树突细胞%人外周血%富集白细胞层%细胞培养
樹突細胞%人外週血%富集白細胞層%細胞培養
수돌세포%인외주혈%부집백세포층%세포배양
目的 探讨从人外周血富集白细胞层(白膜)分离、培养树突状细胞(dendritic cell,DC)的方法.方法 用PBS液与白膜1∶1稀释,采用Ficoll淋巴细胞分离液对稀释后的白膜进行淋巴细胞分离,2h后弃悬浮细胞,加入重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、重组人白细胞介素-4(rhIL-4)和DMEM完全培养液培养,体外培养第6天,加入肿瘤坏死因子(TNF-α)促进其分化成熟.用流式细胞仪(flow cytometer,FCM)检测细胞表型.在倒置显微镜下观察细胞形态.结果 显微镜下观察,细胞呈不规则形状,膜表面向外伸出许多树枝样细长突起;成熟DC细胞表面CD83、CD86、CD1a、HLA-DR分子表达明显增高;平均每份白膜(200mL全血)可以获得(3.87±0.31)×107个成熟DC.结论 作者建立了一种从白膜中分离、培养树突状细胞的方法,可获得数量较多、纯度较高的DC,为DC瘤苗的来源开创了一条新途径,并为血液的合理利用找到了一个新方式.
目的 探討從人外週血富集白細胞層(白膜)分離、培養樹突狀細胞(dendritic cell,DC)的方法.方法 用PBS液與白膜1∶1稀釋,採用Ficoll淋巴細胞分離液對稀釋後的白膜進行淋巴細胞分離,2h後棄懸浮細胞,加入重組人粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、重組人白細胞介素-4(rhIL-4)和DMEM完全培養液培養,體外培養第6天,加入腫瘤壞死因子(TNF-α)促進其分化成熟.用流式細胞儀(flow cytometer,FCM)檢測細胞錶型.在倒置顯微鏡下觀察細胞形態.結果 顯微鏡下觀察,細胞呈不規則形狀,膜錶麵嚮外伸齣許多樹枝樣細長突起;成熟DC細胞錶麵CD83、CD86、CD1a、HLA-DR分子錶達明顯增高;平均每份白膜(200mL全血)可以穫得(3.87±0.31)×107箇成熟DC.結論 作者建立瞭一種從白膜中分離、培養樹突狀細胞的方法,可穫得數量較多、純度較高的DC,為DC瘤苗的來源開創瞭一條新途徑,併為血液的閤理利用找到瞭一箇新方式.
목적 탐토종인외주혈부집백세포층(백막)분리、배양수돌상세포(dendritic cell,DC)적방법.방법 용PBS액여백막1∶1희석,채용Ficoll림파세포분리액대희석후적백막진행림파세포분리,2h후기현부세포,가입중조인립세포-거서세포집락자격인자(rhGM-CSF)、중조인백세포개소-4(rhIL-4)화DMEM완전배양액배양,체외배양제6천,가입종류배사인자(TNF-α)촉진기분화성숙.용류식세포의(flow cytometer,FCM)검측세포표형.재도치현미경하관찰세포형태.결과 현미경하관찰,세포정불규칙형상,막표면향외신출허다수지양세장돌기;성숙DC세포표면CD83、CD86、CD1a、HLA-DR분자표체명현증고;평균매빈백막(200mL전혈)가이획득(3.87±0.31)×107개성숙DC.결론 작자건립료일충종백막중분리、배양수돌상세포적방법,가획득수량교다、순도교고적DC,위DC류묘적래원개창료일조신도경,병위혈액적합리이용조도료일개신방식.
