中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2009年
11期
1488-1490
,共3页
赵丽晶%赵淑华%许多%刘艳波%梁作文%张灵%赵雪俭
趙麗晶%趙淑華%許多%劉豔波%樑作文%張靈%趙雪儉
조려정%조숙화%허다%류염파%량작문%장령%조설검
人乳头瘤病毒%L1基因%真核表达载体
人乳頭瘤病毒%L1基因%真覈錶達載體
인유두류병독%L1기인%진핵표체재체
目的 从感染人乳头瘤病毒(HPV)的新鲜宫颈癌组织中扩增HPV16型晚期蛋白L1基因全长,构建表达载体,并验证目的 蛋白的表达.方法 根据基因全长设计一对特异引物,用PCR的方法从宫颈癌组织DNA中获得L1基因,以pMD18T为克隆载体,构建重组质粒进行亚克隆,再以pcDNA3.1(+)为载体构建表达质粒,转染至人肝细胞系H7702,提取蛋白,采用Western Blot方法检测HPV16-L1蛋白的表达.结果 从长春地区宫颈癌临床标本克隆到的HPV16型L1蛋白编码序列与Genebank报道序列高度同源,其真核表达产物与特异性抗体能够特异性结合.结论 成功构建重组表达质粒pcDNA3.1(+)-HPV16-L1,为进一步研制HPV预防性疫苗创造基础条件.
目的 從感染人乳頭瘤病毒(HPV)的新鮮宮頸癌組織中擴增HPV16型晚期蛋白L1基因全長,構建錶達載體,併驗證目的 蛋白的錶達.方法 根據基因全長設計一對特異引物,用PCR的方法從宮頸癌組織DNA中穫得L1基因,以pMD18T為剋隆載體,構建重組質粒進行亞剋隆,再以pcDNA3.1(+)為載體構建錶達質粒,轉染至人肝細胞繫H7702,提取蛋白,採用Western Blot方法檢測HPV16-L1蛋白的錶達.結果 從長春地區宮頸癌臨床標本剋隆到的HPV16型L1蛋白編碼序列與Genebank報道序列高度同源,其真覈錶達產物與特異性抗體能夠特異性結閤.結論 成功構建重組錶達質粒pcDNA3.1(+)-HPV16-L1,為進一步研製HPV預防性疫苗創造基礎條件.
목적 종감염인유두류병독(HPV)적신선궁경암조직중확증HPV16형만기단백L1기인전장,구건표체재체,병험증목적 단백적표체.방법 근거기인전장설계일대특이인물,용PCR적방법종궁경암조직DNA중획득L1기인,이pMD18T위극륭재체,구건중조질립진행아극륭,재이pcDNA3.1(+)위재체구건표체질립,전염지인간세포계H7702,제취단백,채용Western Blot방법검측HPV16-L1단백적표체.결과 종장춘지구궁경암림상표본극륭도적HPV16형L1단백편마서렬여Genebank보도서렬고도동원,기진핵표체산물여특이성항체능구특이성결합.결론 성공구건중조표체질립pcDNA3.1(+)-HPV16-L1,위진일보연제HPV예방성역묘창조기출조건.
