生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2011年
4期
19-22
,共4页
段佳%黄岚珍%何晓松%易世江%范才文%肖胜军%雷迅
段佳%黃嵐珍%何曉鬆%易世江%範纔文%肖勝軍%雷迅
단가%황람진%하효송%역세강%범재문%초성군%뢰신
stathmin%RNA干扰%质粒%基因治疗
stathmin%RNA榦擾%質粒%基因治療
stathmin%RNA간우%질립%기인치료
目的:构建stathmin特异性SiRNA质粒表达载体,探讨其对鼻咽癌5-8F细胞stathmin的沉默作用.方法:合成用于stathmin基因特异性干扰表达的DNA片段,经退火形成双链DNA片段,片段克隆到质粒表达载体pGenesil 1.1上.载体导入JM109菌株进行筛选与扩增,采用酶切和测序对克隆表达载体进行鉴定.应用脂质体将鉴定后的重组表达质粒载体转入鼻咽癌5 -8F细胞,RT-PCR与Western Blot分析stathmin基因表达.结果:经酶切和测序鉴定,插入SiRNA质粒表达载体的stathmin特异性碱基序列和方向正确.重组质粒表达载体转染鼻咽癌细胞后,细胞转染效率达78.8 ±6.8％,stathmin基因在鼻咽癌中的表达明显下降.结论:构建的stathmin基因SiRNA质粒表达载体能抑制stathmin的表达.
目的:構建stathmin特異性SiRNA質粒錶達載體,探討其對鼻嚥癌5-8F細胞stathmin的沉默作用.方法:閤成用于stathmin基因特異性榦擾錶達的DNA片段,經退火形成雙鏈DNA片段,片段剋隆到質粒錶達載體pGenesil 1.1上.載體導入JM109菌株進行篩選與擴增,採用酶切和測序對剋隆錶達載體進行鑒定.應用脂質體將鑒定後的重組錶達質粒載體轉入鼻嚥癌5 -8F細胞,RT-PCR與Western Blot分析stathmin基因錶達.結果:經酶切和測序鑒定,插入SiRNA質粒錶達載體的stathmin特異性堿基序列和方嚮正確.重組質粒錶達載體轉染鼻嚥癌細胞後,細胞轉染效率達78.8 ±6.8％,stathmin基因在鼻嚥癌中的錶達明顯下降.結論:構建的stathmin基因SiRNA質粒錶達載體能抑製stathmin的錶達.
목적:구건stathmin특이성SiRNA질립표체재체,탐토기대비인암5-8F세포stathmin적침묵작용.방법:합성용우stathmin기인특이성간우표체적DNA편단,경퇴화형성쌍련DNA편단,편단극륭도질립표체재체pGenesil 1.1상.재체도입JM109균주진행사선여확증,채용매절화측서대극륭표체재체진행감정.응용지질체장감정후적중조표체질립재체전입비인암5 -8F세포,RT-PCR여Western Blot분석stathmin기인표체.결과:경매절화측서감정,삽입SiRNA질립표체재체적stathmin특이성감기서렬화방향정학.중조질립표체재체전염비인암세포후,세포전염효솔체78.8 ±6.8％,stathmin기인재비인암중적표체명현하강.결론:구건적stathmin기인SiRNA질립표체재체능억제stathmin적표체.
