中国呼吸与危重监护杂志
中國呼吸與危重鑑護雜誌
중국호흡여위중감호잡지
CHINESE JOURANL OF RESPIRATORY AND CRITICAL CARE MEDICINE
2011年
6期
572-576
,共5页
黄坤%吴晓梅%王欣燕%康小文%肖金玲%李兆国
黃坤%吳曉梅%王訢燕%康小文%肖金玲%李兆國
황곤%오효매%왕흔연%강소문%초금령%리조국
肺纤维化%肺损伤%间充质干细胞%博莱霉素%Ⅱ型肺泡上皮细胞%肺表面活性蛋白C
肺纖維化%肺損傷%間充質榦細胞%博萊黴素%Ⅱ型肺泡上皮細胞%肺錶麵活性蛋白C
폐섬유화%폐손상%간충질간세포%박래매소%Ⅱ형폐포상피세포%폐표면활성단백C
目的 通过观察外源性骨髓间充质干细胞( MSC)的肺脏迁移及分化情况,探讨MSC治疗肺纤维化的细胞学机制.方法 体外分离、培养雄性Wistar大鼠的MSC.将60只雌性Wistar大鼠随机分为4组,A组制备博莱霉素致肺纤维化模型；B组和C组分别于博莱霉素注射后,立即和7d后通过尾静脉注入5-溴-2-脱氧尿苷(BrdU)标记的雄鼠MSC液0.5 mL(含细胞数2.5×106个)；D组造模后,立即注入未标记的等量雄鼠MSC液,作为阴性对照.提取肺组织的DNA,通过聚合酶链反应(PCR)检测雄性鼠的性别决定基因(sry基因),以判断外源性MSC是否存在于雌性鼠肺组织中；留取肺组织、新鲜提取的骨髓干细胞和培养至第5代的MSC行BrdU和肺表面活性蛋白C(SP-C)的双重免疫荧光染色,通过逆转录PCR (RT-PCR)检测其是否表达SP-C mRNA和水通道蛋白5(AQP-5)的mRNA,观察MSC移植前后的分化情况.结果 造模后立即和7d后移入雄性MSC的雌性鼠肺组织均可表达sry基因,且肺组织中的MSC可转化为Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ),并具备AECⅡ的形态学特征和分子生物学表型,但立即移入组明显好于7d后移入组(P＜0.01).新提取的骨髓干细胞和培养至第5代的MSC表达SP-C mRNA,而不表达AQP-5 mRNA,且SP-C的免疫荧光染色阴性.结论 外源性MSC可移入到损伤的肺组织内并转化为AECⅡ,而且早期移入更显著.这种分化潜能在骨髓阶段已具备,但要到损伤的微环境下才能发生转化.
目的 通過觀察外源性骨髓間充質榦細胞( MSC)的肺髒遷移及分化情況,探討MSC治療肺纖維化的細胞學機製.方法 體外分離、培養雄性Wistar大鼠的MSC.將60隻雌性Wistar大鼠隨機分為4組,A組製備博萊黴素緻肺纖維化模型；B組和C組分彆于博萊黴素註射後,立即和7d後通過尾靜脈註入5-溴-2-脫氧尿苷(BrdU)標記的雄鼠MSC液0.5 mL(含細胞數2.5×106箇)；D組造模後,立即註入未標記的等量雄鼠MSC液,作為陰性對照.提取肺組織的DNA,通過聚閤酶鏈反應(PCR)檢測雄性鼠的性彆決定基因(sry基因),以判斷外源性MSC是否存在于雌性鼠肺組織中；留取肺組織、新鮮提取的骨髓榦細胞和培養至第5代的MSC行BrdU和肺錶麵活性蛋白C(SP-C)的雙重免疫熒光染色,通過逆轉錄PCR (RT-PCR)檢測其是否錶達SP-C mRNA和水通道蛋白5(AQP-5)的mRNA,觀察MSC移植前後的分化情況.結果 造模後立即和7d後移入雄性MSC的雌性鼠肺組織均可錶達sry基因,且肺組織中的MSC可轉化為Ⅱ型肺泡上皮細胞(AECⅡ),併具備AECⅡ的形態學特徵和分子生物學錶型,但立即移入組明顯好于7d後移入組(P＜0.01).新提取的骨髓榦細胞和培養至第5代的MSC錶達SP-C mRNA,而不錶達AQP-5 mRNA,且SP-C的免疫熒光染色陰性.結論 外源性MSC可移入到損傷的肺組織內併轉化為AECⅡ,而且早期移入更顯著.這種分化潛能在骨髓階段已具備,但要到損傷的微環境下纔能髮生轉化.
목적 통과관찰외원성골수간충질간세포( MSC)적폐장천이급분화정황,탐토MSC치료폐섬유화적세포학궤제.방법 체외분리、배양웅성Wistar대서적MSC.장60지자성Wistar대서수궤분위4조,A조제비박래매소치폐섬유화모형；B조화C조분별우박래매소주사후,립즉화7d후통과미정맥주입5-추-2-탈양뇨감(BrdU)표기적웅서MSC액0.5 mL(함세포수2.5×106개)；D조조모후,립즉주입미표기적등량웅서MSC액,작위음성대조.제취폐조직적DNA,통과취합매련반응(PCR)검측웅성서적성별결정기인(sry기인),이판단외원성MSC시부존재우자성서폐조직중；류취폐조직、신선제취적골수간세포화배양지제5대적MSC행BrdU화폐표면활성단백C(SP-C)적쌍중면역형광염색,통과역전록PCR (RT-PCR)검측기시부표체SP-C mRNA화수통도단백5(AQP-5)적mRNA,관찰MSC이식전후적분화정황.결과 조모후립즉화7d후이입웅성MSC적자성서폐조직균가표체sry기인,차폐조직중적MSC가전화위Ⅱ형폐포상피세포(AECⅡ),병구비AECⅡ적형태학특정화분자생물학표형,단립즉이입조명현호우7d후이입조(P＜0.01).신제취적골수간세포화배양지제5대적MSC표체SP-C mRNA,이불표체AQP-5 mRNA,차SP-C적면역형광염색음성.결론 외원성MSC가이입도손상적폐조직내병전화위AECⅡ,이차조기이입경현저.저충분화잠능재골수계단이구비,단요도손상적미배경하재능발생전화.
