CAJ | 학술논문

通过对GenBank发布的猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病毒(PRV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的核苷酸序列进行比对分析,找出PPV的VP2基因,PRV的gH基因和PCV2的ORF2基因的相对保守区域.利用生物学软件在保守序列分别设计高溶解温度引物,将常规三温式PCR过程中的退火与延伸合并为一步,通过对PCR反应条件的优化,确定最佳引物浓度、最佳聚合酶浓度、最佳退火温度以及最佳反应体积,建立了多重二温式PCR方法检测PPV、PRV和PCV2,其扩增的目的片断大小分别为PPV( 142 bp)、PRV (300 bp)和PCV2 (469 bp),从而节省临床检测时间,同时又能通过一个反应体系对PPV、PRV和PCV2 3种猪主要DNA病毒进行检测.用30份临床病料对本研究多重PCR技术和单项PCR技术进行对比验证,结果显示,两者的总符合率为95％以上.表明建立的多重PCR检测方法,具有高度特异、快速、敏感等特点,可用于对这3种病毒的同时检测和鉴别诊断.
통과대GenBank발포적저세소병독(PPV)、위광견병독(PRV)화저원배병독2형(PCV2)적핵감산서렬진행비대분석,조출PPV적VP2기인,PRV적gH기인화PCV2적ORF2기인적상대보수구역.이용생물학연건재보수서렬분별설계고용해온도인물,장상규삼온식PCR과정중적퇴화여연신합병위일보,통과대PCR반응조건적우화,학정최가인물농도、최가취합매농도、최가퇴화온도이급최가반응체적,건립료다중이온식PCR방법검측PPV、PRV화PCV2,기확증적목적편단대소분별위PPV( 142 bp)、PRV (300 bp)화PCV2 (469 bp),종이절성림상검측시간,동시우능통과일개반응체계대PPV、PRV화PCV2 3충저주요DNA병독진행검측.용30빈림상병료대본연구다중PCR기술화단항PCR기술진행대비험증,결과현시,량자적총부합솔위95％이상.표명건립적다중PCR검측방법,구유고도특이、쾌속、민감등특점,가용우대저3충병독적동시검측화감별진단.