热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2012年
1期
79-83
,共5页
龙眼%苯丙氨酸解氨酶%表达
龍眼%苯丙氨痠解氨酶%錶達
용안%분병안산해안매%표체
为获得龙眼PAL基因的序列,并研究该基因在转录水平的表达,采用反转录PCR获得PAL的保守序列,然后利用RACE法克隆PAL基因的3′cDNA和5′cDNA序列,再利用DNAMAN软件拼接获得PAL基因的cDNA全长序列.以actin基因作为内参进行实时荧光定量PCR,研究PAL基因在4个龙眼品种嫩叶中的表达差异.结果表明,克隆得到Dlpal基因的cDNA全长序列为2 532 bp,开放阅读框为2 101 bp,编码839个氨基酸,分子量为92.259 ku,等电点为7.38.BLAST比对结果显示,该序列与其它物种的PAL基因具有较高的同源性.实时荧光定量PCR结果表明,Dlpal基因在4个龙眼品种‘乌龙岭’、‘松风本’、‘立冬本’和‘石峡’的嫩叶间的表达量差异显著,其中在'立冬本’中表达量最高,在松风本中表达量最低.初步证明PAL基因在不同品种的龙眼叶片中的表达量差异显著.
為穫得龍眼PAL基因的序列,併研究該基因在轉錄水平的錶達,採用反轉錄PCR穫得PAL的保守序列,然後利用RACE法剋隆PAL基因的3′cDNA和5′cDNA序列,再利用DNAMAN軟件拼接穫得PAL基因的cDNA全長序列.以actin基因作為內參進行實時熒光定量PCR,研究PAL基因在4箇龍眼品種嫩葉中的錶達差異.結果錶明,剋隆得到Dlpal基因的cDNA全長序列為2 532 bp,開放閱讀框為2 101 bp,編碼839箇氨基痠,分子量為92.259 ku,等電點為7.38.BLAST比對結果顯示,該序列與其它物種的PAL基因具有較高的同源性.實時熒光定量PCR結果錶明,Dlpal基因在4箇龍眼品種‘烏龍嶺’、‘鬆風本’、‘立鼕本’和‘石峽’的嫩葉間的錶達量差異顯著,其中在'立鼕本’中錶達量最高,在鬆風本中錶達量最低.初步證明PAL基因在不同品種的龍眼葉片中的錶達量差異顯著.
위획득용안PAL기인적서렬,병연구해기인재전록수평적표체,채용반전록PCR획득PAL적보수서렬,연후이용RACE법극륭PAL기인적3′cDNA화5′cDNA서렬,재이용DNAMAN연건병접획득PAL기인적cDNA전장서렬.이actin기인작위내삼진행실시형광정량PCR,연구PAL기인재4개용안품충눈협중적표체차이.결과표명,극륭득도Dlpal기인적cDNA전장서렬위2 532 bp,개방열독광위2 101 bp,편마839개안기산,분자량위92.259 ku,등전점위7.38.BLAST비대결과현시,해서렬여기타물충적PAL기인구유교고적동원성.실시형광정량PCR결과표명,Dlpal기인재4개용안품충‘오룡령’、‘송풍본’、‘입동본’화‘석협’적눈협간적표체량차이현저,기중재'입동본’중표체량최고,재송풍본중표체량최저.초보증명PAL기인재불동품충적용안협편중적표체량차이현저.
