用逆转录聚合酶链反应方法检测SARS冠状病毒
용역전록취합매련반응방법검측SARS관상병독
Detection of severe acute respiratory syndrome probable patients' virus RNA in Hangzhou by using a two loci and a modified nested real-time reverse transcription polymerase chain reaction
  • 万方数据
    中华预防医学杂志 중화예방의학잡지
    CHINESE JOURNAL OF
    2005年 2期 129-132 ,共4页

    叶榕%潘劲草%黄志成%王衡%汪皓秋%韦东芳%许珂%闻洪根%陈康凯

    협용%반경초%황지성%왕형%왕호추%위동방%허가%문홍근%진강개

    冠状病毒,人%逆转录聚合酶链反应%免疫测定 冠狀病毒,人%逆轉錄聚閤酶鏈反應%免疫測定
    관상병독,인%역전록취합매련반응%면역측정
    目的应用双位点逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和改良巢式实时RT-PCR方法检测临床标本中SARS冠状病毒(SARS-CoV)核酸,以提高检测的可靠性和灵敏度.方法对2003年杭州市3例严重急性呼吸综合征(SARS)临床确诊患者、4例疑似和27名医学观察者的咽拭子标本用巢式实时RT-PCR检测SARS-CoV核酸,对阳性扩增产物进行核酸序列测定,同时对3例患者的标本应用半巢式RT-PCR检测另一位点SARS-CoV核酸片段,并应用常规实时RT-PCR技术及改良实时RT-PCR技术进行检测.结果 3例患者的巢式RT-PCR检测结果2例阳性,4例疑似和27名医学观察者均为阴性;阳性扩增产物的核酸序列与SARS-CoV基因组相应部分序列完全一致.3例患者标本的另一位点的半巢式RT-PCR及实时RT-PCR结果均相同.在检测低拷贝数标本时,常规实时RT-PCR技术在约35个循环后出现弱阳性信号,但改良的巢式实时RT-PCR技术可使强阳性信号在10个扩增循环后出现.结论双位点RT-PCR方法是提高检测准确性的有效方法,改良巢式实时RT-PCR技术较常规实时RT-PCR技术具有更高的灵敏度.
    목적응용쌍위점역전록취합매련반응(RT-PCR)화개량소식실시RT-PCR방법검측림상표본중SARS관상병독(SARS-CoV)핵산,이제고검측적가고성화령민도.방법대2003년항주시3례엄중급성호흡종합정(SARS)림상학진환자、4례의사화27명의학관찰자적인식자표본용소식실시RT-PCR검측SARS-CoV핵산,대양성확증산물진행핵산서렬측정,동시대3례환자적표본응용반소식RT-PCR검측령일위점SARS-CoV핵산편단,병응용상규실시RT-PCR기술급개량실시RT-PCR기술진행검측.결과 3례환자적소식RT-PCR검측결과2례양성,4례의사화27명의학관찰자균위음성;양성확증산물적핵산서렬여SARS-CoV기인조상응부분서렬완전일치.3례환자표본적령일위점적반소식RT-PCR급실시RT-PCR결과균상동.재검측저고패수표본시,상규실시RT-PCR기술재약35개순배후출현약양성신호,단개량적소식실시RT-PCR기술가사강양성신호재10개확증순배후출현.결론쌍위점RT-PCR방법시제고검측준학성적유효방법,개량소식실시RT-PCR기술교상규실시RT-PCR기술구유경고적령민도.
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